Etude du polymorphisme génétique de la mercaptopyruvate sulfurtransférase (MPST) et de la thiosulfate sulfurtransférase (TST ou rhodanèse), enzymes impliquées dans la détoxication des cyanures chez l'homme

• Auteur / Autrice : Ingrid Billaut-Laden
• Direction : Nicole Houdret-Dollet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie et biologie moléculaire
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Lille 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Sulfur group transferases

Sulfotransférases

Thiosulfate sulfurtransferase

Polymorphisme génétique

Polymorphisme génétique

Cyanures

Détoxication

Cyanures

Résumé

La Mercaptopyruvate Sulfurtransférase (MPST) et la Thiosulfate Sulfurtransférase (TST) sont deux enzymes jouant un rôle central dans la détoxification des cyanures. Un défaut d'activité, d'origine génétique, de ces enzymes pourrait être à l'origine de variations interindividuelles de susceptibilité à la toxicité des cyanures et être impliqué dans la genèse et/ou l'évolution de maladies héréditaires. Notre travail a consisté à évaluer la nature et l'étendue de la variabilité de la séquence nucléotidique des gènes de ces deux enzymes dans une population d'individus sains et de patients atteints de deux pathologies intestinales à composante environnementale et génétique, à l'aide d'une stratégie basée sur le couplage de l'analyse du polymorphisme de conformation de fragments d'ADN simple brin générés par réaction de polymérisation en chaîne (PCR-SSCP) et du séquençage. Ce travail nous a permis d'identifier de nombreux variants de ces gènes. L'étude in vitro et in vivo des conséquences fonctionnelles de ces variants sur l'expression des gènes et l'activité des enzymes codées a ensuite été effectuée. Les résultats de ce travail démontrent pour la première fois l'existence d'un polymorphisme génétique fonctionnel de la MPST et de la TST. Les conséquences cliniques de ces polymorphismes restent à démonter.

The Mercaptopyruvate Sulfurtransférase (MPST) and the Thiosulfate Sulfurtransférase (TST) are both key enzymes in cyanide detoxification. A deficiency of genetic origin in MPST or TST activity would lead to interindividual variability in susceptibility to cyanide and, consequently, could be involved in the pathogenesis of environmental diseases (ulcerative colitis and Crohn disease). The present work consisted first in the mutational screening of the MPST and TST genes in DNA samples from large groups of healthy individuals and patients, using a PCR-SSCP strategy and sequencing. This strategy allowed us to identify numerous polymorphisms in both genes. The functional consequences of some of the identified polymorphisms were then assessed by in vitro and in vivo assays. Our findings revealed for the first time the existence of a functional genetic polymorphism of MPST and TST. The clinical relevance of these genetic polymorphisms remains to be analysed.