Thèse soutenue

Détection, caractérisation et mesure d'un nouveau dommage radio-induit de l'ADN isolé cellulaire
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Auteur / Autrice : Peggy Regulus
Direction : Jean-Luc Ravanat
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Chimie - Biologie
Date : Soutenance en 2006
Etablissement(s) : Grenoble 1

Mots clés

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Résumé

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L'acide desoxyribonucleique (adn) est porteur de l'information genetique et les consequences biologiques des lesions survenant sur cette molecule peuvent et re importantes. Nous avons utilise la chromatographie liquide haute performance couplee a la spectrometrie de masse en mode tandem (clhp/sm-sm) pour mettre en evidence la formation de nouvelles lesions radio-induites de l'adn. L'analyse par clhp/sm-sm en mode« perte de neutre» utilise la perte de 116 unites de masse, specifique de la fragmentation de la majorite des nucleosides. Ainsi, 4 nouvelles lesions radio-induites, dont la formation est proportionnelle a la dose d'irradiation, ont ete detectees dans l'adn isole. L'une d'elles, la dcyd341 est de plus formee dans l'adn cellulaire. Il s'agit d'une modification de la 2'desoxycytidine (dcyd) ayant un poids moleculaire de 341 uma. La synthese chimique de ce nucleoside modifie nous a permis de le caracteriser par resonance magnetique nucleaire (rmn) et de determiner sa masse exacte. Un mecanisme de formation a ete propose, dans lequel l'evenement initiateur est l'arrachement de l'atome d'hydrogene en position 4 du 2-desoxyribose (dr) generant un intermediaire aldehydique capable de reagir sur une cytosine voisine. La dcyd341 peut etre consideree comme un dommage complexe, sa formation impliquant une cassure de la chaine d'adn et un pontage entre un produit de modification du dr et une dcyd voisine. En plus de sa caracterisation, de premieres etudes biologiques portant sur la reparation de la dcyd341 ont revele que la lesion est excisee de l'adn avec une certaine efficacite.