Caractérisation de polymères et étude de complexes non covalents ADN-polymère par spectrométrie de masse

Characterisation of polymers and study of DNA-polymer non-covalent complexes using mass spectrometry

• Auteur / Autrice : Péran Terrier
• Direction : Jeanine Tortajada
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Spectrochimie, analyse organique et biologique
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Evry-Val d'Essonne

Mots clés

Mots clés contrôlés

Polymères

Spectrométrie de masse

Résumé

Ce travail de thèse s'organise en deux parties, l'une portant sur la caractérisation de polymères, l'autre sur l'étude de complexes non covalents ADN-polymère par spectrométrie de masse. Les polymères en question font actuellement l'objet de recherches dans le domaine de la vectorisation en thérapie génique. La première partie est consacrée à l'analyse de copolymères à blocs d'oxyde d'éthylène et d'oxyde de propylène. La détermination de leur composition globale (nombre de motifs de répétition) et la détection de sous-produits ont été réalisées grâce à la technique MALDI-MS. L'influence des paramètres expérimentaux liés à l'analyse a été explorée. La caractérisation de la séquence des polymères (organisation des motifs de répétition au sein des chaînes) a été effectuée grâce à la technique Electrospray-MS/MS. La seconde partie concerne l'étude de complexes non covalents impliquant l'ADN et des polymères cationiques (peptides basiques, polyamines). Ces complexes ont pu être obtenus en phase gazeuse grâce aux méthodes d'ionisation Electrospray et MALDI. Dans les deux cas, la pertinence des ions détectés en mode d'analyse MS a été discutée, et les interactions maintenant ces complexes ont été sondées grâce au mode MS/MS.

This PhD work is composed of two parts, dealing with the characterisation of polymers and the study of DNA-polymer non-covalent complexes using mass spectrometry. The polymers under study are presently tested as gene therapy vectors. The first part is dedicated to the analysis of poly(oxyethylene) and poly(oxypropylene) block copolymers. The determination of their global composition (number of repeat units) and the detection of by-products was achieved using MALDI-MS. The influence of experimental parameters was investigated. The characterisation of the polymer sequences (order of the repeat units within the chains) was achieved thanks to Electrospray-MS/MS. The second part deals with the study of non-covalent complexes involving DNA and cationic polymers (basic peptides, polyamines). We managed to obtain these complexes in the gas phase using Electrospray and MALDI ionizations. In both cases, the relevance of the detected ions in MS mode was discussed, and interactions involved in the complexes were probed by MS/MS mode.