Différentiation in vitro des cellules embryonnaires de souris en cellules pancréatiques

In vitro differentiation of mouse embryonic stem cells into pancreatic cells

• Auteur / Autrice : Mélanie Marchand
• Direction : Pierre Savatier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Lyon, École normale supérieure (sciences)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Pancréas

Facteurs de transcription

Différenciation cellulaire

Cellules souches embryonnaires

Résumé

Les cellules souches embryonnaires (cellules ES) sont des candidates prometteuses pour la thérapie cellulaire de nombreuses pathologies, dont le diabète de type I. Pour favoriser la différenciation in vitro des cellules ES en cellules pancréatiques endocrines et exocrines, nous avons développé des nouvelles stratégies reposant sur l’expression ectopique de facteurs de transcription (Pdx-1, Hlxb9, p48, Ngn-3, NeuroD1, Pax4, Isl-1, Nkx2. 2, Nkx6. 1) impliqués dans le développement du pancréas. Nous avons utilisé des vecteurs lentiviraux pour établir 12 lignées de cellules ES exprimant stablement un, deux, trois ou quatre facteurs et des vecteurs adénoviraux pour exprimer transitoirement certains facteurs dans les cellules ES en cours de différenciation. Les résultats obtenus montrent que l’expression combinée de p48 et Pdx-1 stimule la différenciation exocrine et l’expression combinée de NeuroD1 et Pax-4 stimule la différenciation endocrine in vitro des cellules ES.

Embryonic stem (ES) cells are promising candidates for cell replacement therapies of various disorders including type I diabetes. Experimental strategies were developed to promote differentiation of mouse ES cells into endocrine and exocrine cells. These strategies were based on forced expression of transcription factors (Pdx-1, Hlxb9, p48, Ngn-3, NeuroD1, Pax4, Isl-1, Nkx2. 2, Nkx6. 1) expressed at different stages of pancreas development. Twelve ES cell lines stably expressing one, two, three and four transcription factors were generated by means of lentiviral vectors and adenoviral vectors were used to express factors in the course of cell differentiation. The results show that overexpression of p48 and Pdx-1 increases the exocrine differentiation and overexpression of NeuroD1 and Pax4 stimulates endocrine differentiation of ES cells.