Transfert de gène dans les cellules souches hématopoïétiques : application à la thérapie génique des porphyries érythropoïétiques

Gene Transfer in hematopoietic stem cells : application to the gene therapy of erythropoietic porphyria

• Auteur / Autrice : Elodie Robert-Richard
• Direction : François Moreau-Gaudry
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et médicales. Biologie-Santé
• Date : Soutenance en 2006
• Etablissement(s) : Bordeaux 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Vecteurs de clonage

Lentivirus

Transfert génétique

Thérapie génique

Porphyries

Greffe

Cellules souches hématopoïétiques

Résumé

La porphyrie erythropoietique congénitale (PEC) est une maladie monogénique hématologique sévère liée à un déficit en uroporphyrinogène III synthase, conduisant à l'accumulation toxique de porphyrines dans les issus hématopoietiques. La greffe allogénique de cellules souches hématopoietiques (CSH) génétiquement modifiées peut être une alternative à l'allogreffe de moelle osseuse en cas d'absence de donneurs HLA compatibles. Dans notre étude, des vecteurs dérivés de lentivirus ont été développés pour obtenir un tranqfert de gène efficace et stable dans les CSH murines et humaines. Ces vecteurs permettent une expression erythroide-spécifique du gène thérapeutique entraînant une correction enzymatique, métabolique et phénotypique complète du modèle murin PEC. L'évaluation de l'efficacité du transfert de gène dans les CSH humaines in vivo dans des souris immunodéficientes NOD/SCID sera un prérequis avant la mise en place d'un protocole clinique de thérapie génique.

Congenital erythropoietic porphyria (CEP) is an hematological genetic disease characterized by an uroporphyrinogen III synthase deficiency, leading to an accumulation of toxic porphyrin in hemotopoietic tissues. Transplantation of genetically modified hematopoietic stem cells (HSCs) could represent an alternative to bone marrow transplantation when a match-HLA graft is not available. In our work, lentiviral vectors were developed to obtain a stable and efficient gene transfer in murine and human HSCs. These vectors allow an erythroid-specific expression of the therapeutic gene leading to a complete enzymatic, metabolic and phenotypic correction of CEP mice. Evaluation of efficiency of gene transfer in human HSCs in an immunodeficient NOD/SCID model is a necessary step before we consider a gene therapy clinical trial for this disease.