Contribution à l'étude de la signalisation phospholipidique dans la lignée lymphoïde T : rôle de la phospholipase D

Phospholipase D signaling in T lymphocyte

• Auteur / Autrice : Safouane Hamdi
• Direction : Michel Record
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Antigènes CD

Lymphocytes T

Phospholipides

Mots clés libres

Phospholipides

Phospholipase

Acide phosphatidique

LymphocyteT

Cd28

Signalisation

Résumé

Les glycérophospholipides membranaires produisent sous l'action des phospholipases des seconds messagers phospholipidiques. Ainsi, la phospholipase D produit spécifiquement l'acide phosphatidique (PA), un médiateur impliqué dans de nombreuses fonctions cellulaires comme la prolifération ou l'organisation du cytosquelette. Son rôle est cependant mal connu dans les lymphocytes T, cellules-clés du système immunitaire. L'objectif de ce travail a été d'explorer l'impact de la surexpression des isoformes PLD1 et PLD2 dans un modèle lymphocytaire T murin. Deux outils originaux ont été mis en place : la surexpression rétro-virale de la PLD et une technique de quantification des phospholipides par HPLC-fluorimétrie. En étudiant la sécrétion d'IL-2 après stimulation, nous montrons que la PLD1 est en aval du complexe TCR-CD3 et la PLD2 en aval du co-récepteur CD28. Par ailleurs, les deux isoformes confèrent à la lignée étudiée une sensibilité augmentée au sirolimus. Le travail se poursuit dans deux directions : l'identification des cibles du PA et l'exploration du rôle de la PLD dans la physiopathologie des hémopathies lymphoïdes.

Although phosphatidic acid, the phospholipase D (PLD) product, is an emerging lipid mediator in the myeloid lineage, its role in T lymphocyte activation remains unclear. To address this issue, we enforced murine PLD2 isoform expression in the murine 2B4 T-cell hybridoma using a retroviral-mediated gene transfer. Here, we show that this system enabled efficient and stable PLD2 expression and activity. During agonist peptide challenge, we found that PLD2-transduced hybridomas exhibite a ten-fold lower threshold activation and secrete more IL-2 than mock-transduced cells. We showed that IL-2 overproduction and lowered threshold depended on CD28 ligation. Moreover, they relied on a phosphoinositide-3 Kinase activity and were prevented by a pharmacological inhibitor of mTOR. Together, these findings highlight an unexpected functional significance of the recently described signaling pathway PLD/mTOR and open up new avenues to study the role of PLD in T cell functions.