Approches moléculaires des mécanismes mis en jeu en fin de schizogonie intraérythrocytaire de Plasmodium falciparum (agent du paludisme) par hybridation soustractive suppressive et puces à ADN

Molecular studies of the mechanisms involved during the intraerythrocytic schizogony of Plasmodium falciparum (the malarial agent) by suppression subtractive hybridization and microarrays

• Auteur / Autrice : Sébastien Charneau
• Direction : Philippe Grellier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie moléculaire et cellulaire des protozoaires
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Paris, Muséum national d'histoire naturelle
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la nature et de l'Homme - Évolution et écologie (Paris ; 1995-....)
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Philippe Grellier, Stanislas Tomavo, Peter H. David, Joseph Schrevel
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Catherine Braun-Breton, Vincent Robert

Mots clés

Mots clés contrôlés

Hybridation

Filtres à ADN

Bases de données

Code génétique

Différenciation cellulaire

Génétique

Plasmodium falciparum

Résumé

Le propos de ce travail était d'étudier la différenciation des mérozoi͏̈tes de Plasmodium falciparum à travers son transcriptome. Premièrement, par hybridation soustractive suppressive, nous avons réalisé une banque d'ADNc spécifique de stade. Nous avons identifié 40 gènes exprimés spécifiquement lors de la morphogenèse des mérozoi͏̈tes, certains attendus car codant pour des protéines du mérozoi͏̈te (27,5%), les autres codant pour des protéines aux fonctions inconnues (72,5%). Nous avons caractérisé l'une de ces protéines, la dynamine 2 homologue. Exprimée uniquement lors de la schizogonie, elle pourrait être une molécule-clé de la différenciation des mérozoi͏̈tes et être impliquée dans la division mitochondriale. Deuxièmement, par puces à ADN, nous avons identifié dix gènes, encore non décrits, dont l'expression est significativement modulée par la rottlérine, un inhibiteur de protéines kinases qui stoppe la différenciation des mérozoi͏̈tes conduisant à la lyse du parasite

The aim of this work was to study the differentiation of Plasmodium falciparum merozoite through its transcriptome. First, by suppression subtractive hybridization, we have realised a stage-specific cDNA library. We have identified 40 genes specifically expressed during merozoite morphogenesis, some expected as coding for merozoite proteins (27. 5%), the other coding for proteins of unknown function (72. 5%). We have characterized one of these proteins, the dynamin-2-like. Expressed only during schizogony, it could be a key-molecule of the merozoite differentiation and be involved in mitochondrial division. Second, by microarrays, we have identified 10 genes, as yet unreported, whose expression is significantly modulated by rottlerin, a protein kinase inhibitor that stops merozoite differentiation leading to the parasite lysis