Etude du récepteur nucléaire peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARα) in vivo par recombinaison homologue : création et caractérisation de souris humanisées pour PPARα, création de souris porteuses de l'inactivation conditionnelle de PPARα

• Auteur / Autrice : Caroline Duval
• Direction : Bart Staels
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences pharmaceutiques
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Lille 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéines de fusion recombinantes

Facteurs de transcription

composition chimique

Proliférateurs des péroxysomes

Protéines recombinées

Facteurs de transcription

Composition chimique

Peroxysomes

Résumé

L’athérosclérose est une pathologie inflammatoire chronique de la paroi vasculaire, caractérisée par l’accumulation graduelle de lipides dans la paroi interne des artères. PPARα est un récepteur nucléaire activé par les médicaments hypolipémiants de la classe des fibrates, utilisés dans le traitement de désordres métaboliques prédisposant à l’athérosclérose. PPARα joue un rôle majeur dans l’homéostasie lipidique et glucidique, mais aussi dans le contrôle de l’inflammation vasculaire et apparaît donc comme une cible thérapeutique très intéressante. Le but de nos travaux était de préciser le rôle de PPARα in vivo, via la création de deux modèles de souris génétiquement modifiées par recombinaison homologue, les souris humanisées pour le gène PPARα (KIPPARα) et les souris déficientes pour PPARα de façon tissu-spécifique. Ainsi, après obtention des souris KIPPARα, nous nous sommes intéressés, dans un premier temps ; à la réponse métabolique des souris KIPPARα à un traitement fénofibrate. D’une part, nous avons montré que la protéine h PPARα ne semble pas jouer un rôle prépondérant dans le foie humain, en accord avec l’absence d’induction des gènes cibles due à la faible expression hépatique de hPPARα. D’autre part, les souris KIPPARα soulignent l’importance des tissus périphériques dans la baisse des TG plasmatiques obtenue après un traitement hypolipémiant et devraient nous permettre de déterminer les mécanismes moléculaires impliqués chez l’homme. Avec la caractérisation des souris KIPPARα, nous avons donc validé la création d’un modèle des souris humanisées idéal pour étudier la fonction de la protéine hPPARα in vivo. Par ailleurs, afin de définir la contribution des différents tissus exprimant PPARα dans les effets physiologiques observés suite à une activation de PPARα, nous avons généré des souris porteuses de l’inactivation conditionnelle de PPARα (« floxées »). Ces souris nous permettront, après croisement avec des souris PPARα-déficientes dans le/les tissus d’intérêt.

Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease of the vascular wall characterized by lipid accumulation in the intima of the arteries. PPARα is a nuclear receptor activated by hypolipidemic drugs of the fibrate class, currently used in the treatment of metabolic disorders predisposing to atherosclerosis. PPARα plays a major role in lipid and glucose homeostasis as welle as in the control of vascular inflammation and as such, is a very interesting pharmacological target. The aim of our work was to precise the role of PPARα in vivo by creating two models of genetically modified mice by homologous recombination, the humanized PPARα mice (KIPPARα) and the tissue-specific PPARα knock-out mice. Thus, after generating KIPPARα mice, we first analyzed the KIPPARα metabolic response to a fenofribrate treatment. On the one hand, we have shown that hPPARα protein does not seem to play a major role in the human liver, as reflecting by the absence of hepatic target gene regulation due to hepato-specific knock-out expression. On the other hand, KIPPARα mice highlight the role of peripheral tissues underlying the TG decrease observed after treatment with hypolipidemic drugs and will allow to determine the molecular mechanisms involved in human. By characterizing the KIPPARα mice, we have validated the creation of a humanized model suitable to study hPPARα protein function in vivo. Moreover, to assess the contribution of PPARα-expressing tissues in the physiological effects observed after PPARα activation, we have created mice designed for the conditional knock-out of PPARα (« floxed »). After crossing these mice with tissue-specific transgenic Cre recombinase mice, we will be able to characterize mice deficient for PPARα in the tissues of interest.