Influence des précurseurs de la glycosylation sur la macrohétérogénéité de l'IFN-γ produit en bioréacteur par des cellules CHO
Auteur / Autrice : | Nadine Kochanowski |
Direction : | Jean-Louis Goergen |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Procédés biotechnologiques et alimentaires |
Date : | Soutenance en 2005 |
Etablissement(s) : | Vandoeuvre-les-Nancy, INPL |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Résumé
L'objectif de ce travail était l'étude des facteurs intracellulaires responsables de la macrohétérogénéité de la glycosylation de l'interféron-gamma humain recombinant (IFN) produit en bioréacteur par des cultures discontinues et semi-continues de cellules CHO (Chinese Hamster Ovary). L'analyse des précurseurs oligosaccharidiques a révélé que la structure des glycannes associés aux dol-PP-oligosaccharides demeure constante tout au long du procédé. En revanche, l'hypothèse d'une limitation quantitative des structures glycanniques pouvait être envisagée. De plus, la diminution précoce des pools intracellulaires de nucléotides triphosphates et de la charge énergétique semblait être reliée à la diminution de la glycosylation. Cette hypothèse est renforcée par le fait que le profil de glycosylation de l'IFN est constant et la charge énergétique maintenue à une valeur élevée durant la phase de production de la glycoprotéine lorsque les cellules sont cultivées dans un milieu de culture riche