Conception et réalisation de matériaux biofonctionnels pour des dispositifs capteurs impédimétriques

Design and realization of materials biofonctionnels for impedimeitic sensors

• Auteur / Autrice : Saloua Helali
• Direction : Claude Martelet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences. Physique quantique
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Ecully, Ecole centrale de Lyon
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : CEGELY - Centre de génie électrique de Lyon (Rhône1992-2007)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Voltamétrie

Spectroscopie d'impédance

Biocapteurs

Mots clés libres

Microscope à force atomique

Couples anticorps-antigène

Résumé

La biofonctionnalisation est une étape clé pour la réalisation du biocapteur et donc pour l'obtention de bonnes performances analytiques. Deux procédures de fonctionnalisation de la surface d'or ont été étudiées par mesure d'impédance. Nous avons, en premier lieu, formé sur l'électrode d'or une monocouche auto-assemblée mixte de 1,2 dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(biotinyl) (biotinyl-PE) et d'acide 16-mercaptohexadecanoique (MHDA). L'immobilisation de l'anticorps sur la couche SAM est assurée par la neutravidine qui avec ces quatre sites peut relier les biotines immobilisées sur la surface d'or avec celle de l'anticorps biotinylé. Deux couples anticorps-antigène : Biotinyl-antiHemoglobine/Hemoglobine et Biotinyl-Fab fragment K47/Atrazine ont été détectés. La deuxième procédure celle de l'immobilisation d'une couche des particules magnétiques marquées par la streptavidine en appliquant un champ magnétique de 300 mT.

The biofonctionnalisation is a key step for the realization of the biosensor and thus for obtaining good analytical performances. Two procedure of fonctionnalization of the gold surface were studied by impedance spectroscopy. Initially, we formed on the gold electrode a mixed self-assembled monolayer consisting of 1,2 dipalmitoyl-Sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(biotinyl) (biotinyl-EP) and acid 6-mercaptohexadecanoic (MHDA). The tethered neutravidin was used the biotin sites present in the mixed monolayer, with those associated to the biotinyl-antibody. Two antibody-antigen system : Biotinyl-antiHemoglobine/Hemoglobine and Biotinyl-Fab K47/Atrazine fragment were detected. Second procedure that of the immobilization of a layer of the magnetic particles marked by the streptavidine by applying magnetic fields of 300 mT.