Vers la caractérisation de l'organisation des membranes plasmiques de muscles déficients en dystrophine : étude sur la souris mdx et le chien grmd

Toward dystrophyn deficient muscle plasma membrane characterization : a mdx mouse and grmd dog study

• Auteur / Autrice : Nicolas Cluchague
• Direction : Elisabeth Le Rumeur
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Génie biologique et médical
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Rennes 1

Résumé

Le complexe des protéines associées à la dytrophine (DAPC) permet la liaison cytosquelette/matrice extracellulaire via le dystrophine, protéine absente ds la dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) ainsi que chez la souris mdx et le chien grmd. Les éléments du DAPC très réduits dans le phénotype dystrophique. Nous avons isolé des vésicules de membranes plasmiques à partir de muscles de souris normales et mdx, et de chiens normaux et grmd. Etude de la composition phospholipidique des membranes plasmiques musculaires réalisée par RMN du 31P en HR-MAS. L'analyse de la répartition des phospholipides en utilisant le PrCI3 s'est révélée infructueuse par rapport aux études antérieures sur le lapin, révélant des problèmes de différences interspécifiques. Mise en évidence de la présence de certaines protéines du DPAC en quantité équivalente dans le muscle déficient en dystrophine par rapport au muscle normal. Constat que les protéines du DPAC faisaient l'objet de modification de visibilité avant et après purification des vésicules par gradient de densité de sucrose. La bêta-dystroglycane est indétectable ds le muscle déficient en dystrophine ds la fraction non purifiée, mais est détectée en quantité normale sous 2 formes(43 et 30 kDa)après purification. Cependant un traitement avec un détergent,le cholate de sodium, permet de visualiser la bêta-dystroglycane dans les vésicules non purifiées. La protéine est bien présente au niveau de la membrane mais son accessibilité aux anticorps nécessite un traitement avec un détergent. L'absence de dystrophine ne provoque pas la perte de la totalité des éléments du DAPC, mais modifie leur accessibilité au niveau de la membrane plasmique musculaire. Ces observations apportent des éléments de réflexion nouveaux sur la compréhension de la DMD.