Développement d'un microscope à champ proche optique à force de cisaillement pour application en biologie: imagerie et spectroscopie
Auteur / Autrice : | Guangyi Shang |
Direction : | Michel Troyon |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Physique |
Date : | Soutenance en 2004 |
Etablissement(s) : | Reims |
Mots clés
Résumé
Un microscope à champ proche optique basé sur un nouveau senseur de force fonctionnant dans le mode cisaillement a été développé. Il peut être combiné à un microspectrofluorimètre confocal laser pour des applications biologiques et utilisé dans différents modes de fonctionnement. Le mécanisme de détection des forces de cisaillement a été expérimentalement étudié. Il s'avère que l'origine principale de ce mécanisme est le contact intermittent de la sonde avec la surface de l'échantillon qui permet de contrôler la distance pointe-surface. Les paramètres expérimentaux concernant l'imagerie ainsi que les artefacts dus à la géométrie de la sonde sont discutés. Des images en champ proche optique d'un réseau de silicium dans le mode réflexion ainsi que la spectroscopie de structures électroluminescentes dans le mode collection ont été respectivement obtenues. Comme étude préliminaire pour des applications biologiques, la distribution de P-glycoprotéines dans la membrane plasmatique de petites cellules cancéreuses de langue humaine a été étudiée avec une résolution inférieure à la limite de résolution due à la diffraction. Cette distribution n'est pas homogène et se présente sous forme de petits amas. De plus, des spectres de fluorescence ont été obtenus sur des cellules cancéreuses du poumon humain colorées avec la sonde fluorescente JC-1. Des variations dans le spectre de fluorescence ont été mises en évidence avec une résolution verticale de l'ordre de 100 nm. Ces résultats suggèrent que notre système est un outil d'investigation prometteur pour des applications biologiques, capable de fournir des informations dignes d'intérêt permettant de mieux comprendre certains problèmes biologiques