Caractérisation pharmacologique et structurale de nouveaux sites de liaison de peptides analogues du VIP : le PHI/PHM et le PACAP-38

Pharmacological and structural characterization of novel binding sites for VIP analogues : PHI/PHM and PACAP-38

• Auteur / Autrice : Alicia Montoni
• Direction : Jean-Marc Muller, Thierry Janet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Poitiers
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Ingénierie chimique, biologique et géologique (Poitiers2000-2008)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Poitiers. UFR des sciences fondamentales et appliquées

Mots clés

Mots clés contrôlés

Clonage moléculaire

Pharmacologie moléculaire

Récepteurs

Neuropeptides

Résumé

Les neuropeptides VIP, PACAP et PHI/PHM agissent sur toutes les grandes fonctions physiologiques par l'intermédiaire de récepteurs membranaires couplés à des protéines G (VPAC1, VPAC2 et PAC1). Des sites de liaison présentant un profil pharmacologique atypique ont également été identifiés, notamment des sites de liaison du VIP insensibles au GTP et discriminés par le PHI/PHM. Sur cette base pharmacologique, l'isolement et la caractérisation pharmacologique et fonctionnelle d'un ADNc dont l'expression dans des cellules de mammifères induit une activité de liaison de haute affinité du PHI/PHM a été entreprise. La seconde partie de ce mémoire présente les effets activateurs du VIP et du PACAP sur le transporteur CFTR via des récepteurs présentant une pharmacologie atypique, notamment une haute sélectivité pour le PACAP-38. L'élaboration du radiopeptide 125I-PACAP-38 a conduit à définir, dans les cellules SH-SY-5Y, une nouvelle classe de sites de liaison sélectifs du PACAP-38.

VIP, PACAP and PHI/PHM are neuropeptides act on several physiological functions interacting through G proteins coupled transmembrane receptors (VPAC1, VPAC2 and PAC1). Some particular binding sites presenting a different pharmacological profile have been identified, in particular GTP-insensitive binding sites, selectively discriminated by PHI/PHM. A cDNA (Clone 6) was isolated and characterized according to its ability to induce the binding of PHI/PHM with high affinity in mammalian cells. The second part of this work presents the stimulating properties of VIP and PACAP on CFTR activity, involving receptors with a peculiar pharmacology, particularly an high selectivity for PACAP-38. Development of the 125I-PACAP-38 radiopeptide allowed us to identify a new binding site class of PACAP-38 which interacts neither with PACAP-27 nor with VIP, in a cell culture model (SH-SY5Y human neuroblastoma cell line).