Sélection et analyse génétique de la variabilité des isolats chinois de ''Trichinella'' : caractérisation de gènes conservés ou spécifiques de stade du genre ''Trichinella''

Selection and genetic variability of Chinese ''Trichinella'' isolates : characterisation of conserved and stage specific genes of ''Trichinella''

• Auteur / Autrice : Mingyuan Liu
• Direction : Pascal Boireau
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Hôtes-parasites
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Paris 12

Mots clés

Mots clés contrôlés

Gènes

Épidémiologie

Nématodes

Trichinella

Résumé

Plus de 25000 cas de trichinellose humaine ont été répertoriés en Chine et la mortalité atteint 1%. La comparaison des isolats de trichine d'origine chinoise et européenne a été faite en utilisant la technique d'amplification aléatoire. Afin d'identifier des gènes codant pour des antigènes immunodominants chez Trichinella une double stratégie a été utilisée. L) La première consistait à identifier des gènes codant pour des protéines conservées en utilisant des amorces dégénérées. Deux gènes ont ainsi été caractérisés. 2) La seconde stratégie a été fondée sur la technique d'hybridation soustractive des stades invasifs précoces de Trichinella (Adulte et L1 nouveaux nées (L1NN)) suivie d'une amplification. Des motifs enzymatiques, des glycoprotéines, des éléments potentiellement structuraux du parasite ont ainsi été sélectionnés. Trois gènes ont été reconstruits dont deux sont spécifiquement exprimés au stade Ad et L1 NN.

More than 25000 human trichinellosis cases were reported with a mortality of 1% in China during the last 25 years. Restriction fragment length polymorphism (RFLP) of genomic DNA and random amplified polymorphic cDNA (RAPD) were used to define genetic variability among French and Chinese Trichinella isolates. In order to identify genes encoding immunodominant antigens two strategies were performed 1) conserved gene coding for putative conserved antigen (like HSP) were cloned and analyzed ; two genes were fully characterized 2) Stage specific genes were selected after subtractive hybridization of adult and new born larvae (NBL) stegas with the muscular stage of Trichinella spiralis. Nucleotidic sequences encoding glycoproteins, proteases, transcriptional factors were isolated and the full coding sequences of three genes was analyzed. The putative biological functions in the process of the Nurse cell formation of two NBL stage-specific DNase II genes were suggested and discussed.