Thèse soutenue

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Auteur / Autrice : Elena Kisseleva-Romanova
Direction : Domenico Libri
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques. Génétique
Date : Soutenance en 2004
Etablissement(s) : Paris 11
Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne)

Résumé

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Pour identifier de nouveaux facteurs d'épissage chez la levure S. Cerevisiae, nous avons cherché des suppresseurs multicopies du phénotype cryosensible associé à la mutation U5A dans la particule U1 snRNA (U1-5A). Nous avons isolé des plasmides contenant une région intergénique portant une petite ORF cryptique (appelée PCC1 ) qui contient un intron avec un site d'épissage 5' non canonique. Nous avons montré que PCC1 n'est pas impliqué dans l'épissage, mais que l'épissage de son intron est le principal facteur limitant pour la croissance en présence de la mutation U1-5A. Puisque PCC1 est un gène quasi essentiel, nous avons généré et étudié le mutant thermosensible pcc1-4. Notre analyse a révélé des défauts dans le cycle cellulaire et dans la réponse à la phéromone. Nos données suggèrent que PCC1 est directement impliqué dans la transcription et affecte l'expression de certains gènes, ce qui détermine les phénotypes mutants de pcc1. Le complexe PCC contient trois protéines additionnelles: Kae1p, une métalloprotéase putative, Bud32p, une kinase et Pcc2p. De multiples interactions génétiques et physiques entre ces protéines et les phénotypes des mutants suggèrent que le complexe PCC agit comme une unité dans la cellule et que sa fonction est conservée chez les métazoaires. Nous suggérons que l'activité d'endopeptidase de Kae1p et que l'activité kinase de Bud32p sont les fonctions moléculaires qui déterminent le rôle du complexe PCC dans la transcription. Nous montrons des interactions génétiques entre PCC1 et des facteurs de modification de la chromatine, ce qui suggère que le complexe PCC pourrait influencer la transcription via une fonction de modification de la chromatine.