Propriétés apoptotiques de la protéine de régulation Vpr du VIH-1 : interaction entre Vpr et le translocateur de nucléotides à adénine, neurotoxicité de Vpr

Apoptotic properties of the HIV-1 regulatory protein Vpr : interaction between Vpr and the adenine nucleotide translocator, Vpr neurotoxicity

• Auteur / Autrice : Emmanuelle Sabbah
• Direction : Bernard Roques
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie. Pharmacologie moléculaire et structurale
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Paris 5
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale du Médicament (....-2009Paris)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (....-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Neurotoxicologie

Apoptose

Interactions protéine-protéine

Translocation (génétique)

Dissertations universitaires comme sujet

Protéines virales régulatrices ou accessoires

VIH (virus)

Résumé

Les propriétés apoptotiques de la protéine Vpr du VIH-1 ont été étudiées en caractérisant l'interaction entre Vpr et le translocateur de nucléotides à adénine (ANT) et la neurotoxicité de Vpr. La cartographie des épitopes de Vpr reconnus par des anticorps anti-Vpr a été réalisée. Des techniques de physico-chimie et de biochimie ont permis de déterminer que Vpr se lie à un domaine de l'ANT comprenant sa première boucle intermembranaire via les régions minimales (27-51) et (71-82). Dans notre modèle tridimensionnel, le domaine N-terminal de Vpr pénètre dans la cavité de l'ANT. La microscopie et la cytométrie en flux ont permis d'évaluer les capacités apoptotiques de Vpr et de dérivés sur des cultures primaires de neurones de rat. La région neurotoxique de Vpr est située dans le domaine (70-96). L'activation de la caspase 3 et une surproduction d'espèces activées de l'oxygène ont été observées. Ces résultats pourraient être utilisées dans la recherche d'agents anti-apoptotiques.

The apoptotic properties of the HIV-1 Vpr protein were studied by caracterising the interaction between Vpr and the adenine nucleotide translocator (ANT) and the Vpr neurotoxicity. A mapping of the Vpr epitopes recognized by several anti-Vpr antibodies was done. Biochemical and biophysical techniques have allowed us to determine that Vpr binds to an ANT domain encompassing its first intermembranous loop via the minimal regions (27-51) and (71-82). In the tridimensionnal model we proposed, the Vpr N-terminal region is located in the ANT barrel. Microscopy and flow cytometry were used to evaluate the Vpr apoptotic properties over primary cultures of rat neurons. The Vpr neurotoxic region is located in the (70-96) fragment. Caspase-3 activation and reactive oxygen species hyperproduction were observed. These results could be used during the search of anti-apoptotic agents.