Etude du site actif de l'aminopeptidase A par modélisation moléculaire et mutagenèse dirigée. Définition du rôle du domaine C-terminal de cette enzyme

Study of the active site of aminopeptidase A by molecular modeling and site-directed mutagenesis. Definition of the role of the C-terminal domain of this enzyme

• Auteur / Autrice : Raphaël Rozenfeld
• Direction : Catherine Llorens-Cortes
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie. Pharmacochimie moléculaire
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Paris 5
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale du Médicament (....-2009Paris)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (....-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Mutagénèse dirigée

Molécules -- Modèles

Système rénine-angiotensine

Zinc -- Composés

Inhibiteurs

Aminopeptidase A

Résumé

L'aminopeptidase A (APA), est responsable in vivo de la production de l'angiotensine III, peptide effecteur du système rénine-angiotensine cérébral, qui exerce un effet stimulateur tonique sur le contrôle central de la pression artérielle. Le blocage de la formation de ce peptide dans le cerveau par un inhibiteur spécifique et sélectif de l'APA entraîne un effet antihypertenseur chez les rats hypertendus. L'APA apparaît donc comme une cible dans le traitement de l'hypertension, ce qui justifie la conception d'inhibiteurs spécifiques et sélectifs de cette enzyme. Pour développer de tels composés, nous étudions la topologie du site actif de l'APA par modélisation moléculaire et mutagenèse dirigée. La fonction des résidus identifiés dans le modèle comme étant impliqués dans la liaison du substrat, et la liaison du calcium, ion activateur de l'APA, a été confirmée par mutagenèse dirigée. Les données apportées dans ces études aideront à la conception rationnelle d'inhibiteurs de l'APA

Aminopeptidase A (APA) is responsible for the production of angiotensin III in vivo, which is the effector peptide of the brain renin-angiotensin system, by exerting a tonic stimulatory effect on the central control of blood pressure. The blockade of the formation of this peptide in the brain by a selective and specific APA inhibitor leads to a decrease of blood pressure in hypertensive rats. APA is thus a therapeutic target for the treatment of hypertension, which justifies the conception of specific and selective inhibitors of this enzyme. In order to develop such compounds, we study the organization of the APA active site by molecular modeling and site-directed mutagenesis. The role of the residues identified in the model as being involved in the binding of the substrate and of the calcium ion, which activates APA was confirmed by site-directed mutagenesis. The data collected in these studies will help in the rational design of APA inhibitors.