Thèse soutenue

Caractérisation par microscopie à force atomique d'une puce ADN, de l'élaboration à l'hybridation
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Auteur / Autrice : Marie-Hélène Rouillat
Direction : Magali Phaner-Goutorbe
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences. Matière condensée
Date : Soutenance en 2004
Etablissement(s) : Ecully, Ecole centrale de Lyon
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Laboratoire d'électronique, optoélectronique et microsystèmes (Ecully, Rhône)

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Les puces à ADN sont des systèmes de reconnaissance génétique, élaborées à partir d'un support solide sur lequel sont greffées des monobrins-sondes de séquences connues. Elles permettent d'identifier dans une solution, les brins d'ADN-cibles possédant la séquence complémentaire. Dans le contexte d'une miniaturisation des puces, une analyse par microscopie à force atomique (AFM) de chaque étape de fabrication des puces a été entreprise, de l'immobilisation des sondes jusqu'à la lecture de l'hybridation. Il a été montré que la nature des sondes, séquences et marqueurs fluorescents, influençaient leur organisation en surface et que chaque sonde de 25 bases pouvait être identifiée individuellement. Après hybridation de faibles quantités de cibles, les images AFM ont révelé la présence de brins couchés et dispersés, sur lesquels la zone d'hybridation a été localisée.