Hematopoi͏̈èse et toxicologie : optimisation et développement des méthodes in vitro pour étudier les effets des toxiques sur l'hématopoi͏̈èse humaine et murine

Hematopoiesis and toxicity : optimisation and development of in vitro methods for studying xenobiotics effects on human and murine hematopoiesis

• Auteur / Autrice : Ilaria Malerba
• Direction : Dominique Parent-Massin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Toxicologie
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Brest

Mots clés

Mots clés contrôlés

Tests de toxicité in vitro

Toxicologie

Hématopoïèse

Résumé

Due à son " turn-over " rapide, le système hématopoi͏̈étique est une cible privilégiée pour la toxicité des xénobiotiques. Le but de ce travail a été l'optimisation des protocoles de tests in vitro d'étude en l'hématotoxicité et myélotoxicité, afin de les rendre plus fiables, reproductibles, et peu onéreux et, en même temps, de réduire l'utilisation des animaux de laboratoire. Les protocoles des tests clonogéniques in vitro ont d'abord été perfectionnés chez l'homme, transférés chez la souris et miniaturisés pour réduire les coûts. On a utilisé les cultures long-terme de moelle osseuse qui ont permis de mieux comprendre le rôle du microenvironnement. La caractérisation approfondie de la moelle osseuse humaine a permis d'aboutir à la définition de nouveaux end-points pour étudier l'hématotoxicité et deux nouvelles lignées cellulaires, dérivant de souris transgéniques, ont été utilisées comme modèle pertinent pour clarifier le rôle des cytokines dans les désordres lymphoprolifératifs.

Due to its rapid turnover, the hemopoietic tissue is a sensitive target for xenobiotic toxicity. The aim of the work presented, was protocol optimisation of in vitro tests for hematotoxicity and myelotoxicity, in order to make them more reliable, reproductible and less costly, and to reduce the use of animals. In vitro clonogenic assays were first optimised using human models, then transferred to the murine model and miniaturised for cost reducing. Bone marrow long-term cultures were used to better understand the microenvironnment role. Moreover, human bone marrow characterisation gave rise to new end-points for evaluating hematotoxicity, such as telomerase activity. The study of in vitro model for hematopoietic system is still undergoing development. Two new cellular lines, from transgenic mouse lineage were employed as a useful model for clarifying cytokine role in lymphoproliferative disorders.