Rôle extraduodénal de la lipase sels biliaires dépendantes. Etude in vitro de ses effets dans le processus angiogène

Extraduodenal roll of the salt-dependent lipase : study in vitro of its effects in angiogenic processes

• Auteur / Autrice : Ouafa Rebai
• Direction : Dominique Lombardo
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie, biologie moléculaire et cellulaire. Nutrition, aspects moléculaires et cellulaires
• Date : Soutenance en 2004
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Néovascularisation

Athérosclérose

Facteurs de croissance

Endothélium vasculaire

Lipases

Résumé

La Lipase Sels Biliaires Dépendante (BSDL) est une enzyme pancréatique participant à l'hydrolyse des lipides alimentaires. La BSDL, originellement décrite dans le duodénum, est aussi présente dans le compartiment sérique où elle est véhiculée par les lipoprotéines contenant l'apo-B100. Des expériences de biologie moléculaire et d'hybridation in situ, utilisant les cellules du compartiment vasculaire ou des coupes de tissus, ont permis d'écarter l'hypothèse d'une synthèse de la BSDL à ce niveau là. La recherche de la fonction réelle de cette BSDL sérique a été renforcée lors de l'analyse à l'aide d'anticorps dirigés contre cette protéine de coupes de tissus artériels normaux et athéromateux de singes et d'hommes montrant la présence de la BSDL au niveau de la plaque d'athérome, en particulier au niveau des cellules musculaires lises (CML). Nous avons également analysé in vitro les effets potentiels de la BSDL sur les cellules de la paroi vasculaire, nos modèles d'études étant constitués de cultures de cellules HUVEC et de CML humaines. La BSDL induit une augmentation de la prolifération et de la migration chimiotactique de ces cellules. Elle stimule le processus de réparation (test de la blessure) ainsi que la formation rapide des microtubules. Ces effets stimulés par la BSDL caractérisent le processus de l'angiogenèse. Nous avons montré que ces processus sont dépendants du déplacement des facteurs de croissance b-FGF et VEGF, à partir de la matrice extracellulaire, et de l'activation des voies de signalisation intracellulaire : ERK1/2 MAPK, p38 MAPK et FAK.

The Bile Salt Dependent Lipase (BSDL) is a pancreatic enzyme participating in the hydrolysis of food lipids. Its presence has been also demonstrated in the blood compartment where it is partly associated with lipoproteins containing the apo-B100. Experiences using molecular biology and in situ hybridization performed on vascular cells and on tissue samples, have allowed us to eliminate the synthesis of BSDL by cells of the vascular compartment validating the process of the intestinal transcytosis. The search for the actual function of BSDL in the circulation has been strengthened by immunohistochemistry experiments performed on normal and on atheromatous arterial tissue of monkeys and of men. These studies showed the presence of BSDL at the level of the atheromatous plaque, especially at the level of proliferating smooth muscle cells (SMC). We have determined, in vitro, the potential effects of BSDL on cells in part those of the vascular wall. BSDL induces an increase in the proliferation and in the chimiotactic migration of HUVEC and SMC. It stimulates wound-healing (tested by the injury assay) and promotes the rapid development of microtubules (angiogenesis). These processes are dependent on the displacement of growth factors, b-FGF and VEGF, from the extracellular matrix, and on the activation of ERK1/ 2 and p38MAPK pathways. The FAK seems also activated.