Le fibroblaste humain : cellule effectrice dans l'hématopoi͏̈èse et dans la métaplasie myéloi͏̈de primitive avec myélofibrose

• Auteur / Autrice : Diane Briard
• Direction : Danièle Brouty-Boyé
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 2003
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté de médecine (Le Kremlin-Bicêtre, Val-de-Marne)
• Jury : Président / Présidente : Dominique Émilie
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Danièle Brouty-Boyé, Dominique Émilie, Sophie Ezine, Pierre Charbord, Vincent Praloran, Loïc Fouillard
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Sophie Ezine, Pierre Charbord

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules souches hématopoïétiques

Cellules dendritiques folliculaires

Cellules tueuses naturelles

Myélofibrose primitive

Fibroblastes

Différenciation cellulaire

Facteurs de croissance du fibroblaste

Résumé

Ce travail a été réalisé dans le but de mettre en évidence le rôle prépondérant des fibroblastes dans l'hématopoïèse normale et pathologique. Bien que le rôle du microenvironnement dans l'hématopoïèse soit connu depuis longtemps, la première partie de cette étude montre que les fibroblastes sont, à eux seuls, capables d'agir directement, par contact ou par la sécrétion de facteurs de croissance et de cytokines, sur la prolifération et la différenciation des progéniteurs hématopoïétiques CD34+. Cette capacité d'action dans l'hématopoïèse est spécifique et dépendante de l'origine tissulaire des fibroblastes. En effet, les fibroblastes de la moelle osseuse régissent une différenciation myéloïde à partir des progéniteurs médullaires, mais ces derniers ne se différencient pas au contact des fibroblastes de la rate de patients atteints de Métaplasie Myéloide primitive avec Myélojibrose (MMM). A l'inverse, les fibroblastes spléniques de malades induisent une myéloprolifération des progéniteurs circulants, non observable lors de contacts avec des fibroblastes médullaires. Nous avons également mis en évidence, pour la première fois, le rôle des fibroblastes de la rate dans la différenciation NK et DC des progéniteurs circulants. En effet, par l'intermédiaire de l'IL-15 membranaire, qui se révèle être la forme bioactive de la cytokine, les fibroblastes régissent la différenciation des progéniteurs NK en cellules matures douées d'activité cytotoxique spontanée. En parallèle, les fibroblastes spléniques induisent également la différenciation DC de ces mêmes progéniteurs mais cette fois via l'action du M-CSF qu'ils sécrètent. Nous avons, par la suite, montré que ce sont ces cellules DC immatures qui lors d'interaction airecte avec les cellules NK stimulent l'activité lytique de ces dernières, via la sécrétion d'IL-12. Par extrapolation, nous pouvons envisager que la rate humaine soit un organe ''sentinelle'' de l'immunité naturelle. Enfin, nous avons étudié la différenciation lymphoïde au cours de la MMM et le rôle joué par les fibroblastes spléniques. Nous avons d'abord montré l'incapacité des progéniteurs circulants des malades, à se différencier dans la voie NK, que ce soit sous l'action d'une IL-15 exogène ou au contact d'une IL-15 membranaire. En fait, nous avons constaté que les progéniteurs ne répondait pas à l'action différenciatrice de l'IL-15 en raison de la dérégulation d'une des voies de transduction de l'IL-15, le complexe yc/Jak3 et la phosphorylation de STAT3, qui est spontanément activé indépendamment de l'IL-15. Nous avons aussi observé dans notre modèle de co-culture, une accumulation de cellules immatures des différentes lignées lymphoïdes, ce qui suggère, in-vitro, une déficience en cellules lymphoïdes chez les malades. Puis nous avons montré que les fibroblastes de la rate des malades étaient différents, car seulement capables de produire à partir des progéniteurs circulants normaux, des cellules NK en nombre réduit. Ces cellules NK n'ont pas d'activité cytotoxique spontanée, cette déficience semble liée au nombre réduit de DC simultanément produites qui rendent sans doute la coopération NK/DC beaucoup moins fonctionnelle. Il semble donc que les progéniteurs hématopoïétiques ne sont pas les seuls à être touchés au cours de cette hémopathie, mais que les cellules du microenvironnement le soient également, ce dont il faudrait tenir compte lors de futurs traitements.