Thèse soutenue

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Auteur / Autrice : Claire Veneault-Fourrey
Direction : Thierry Langin
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques
Date : Soutenance en 2003
Etablissement(s) : Paris 11

Mots clés

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Mots clés libres

Résumé

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Colletotrichum lindemuthianum est un champignon phytopathogène, responsable de l'anthracnose du haricot commun, Phaseolus vulgaris, et qui différencie une structure spécialisée pour pénétrer les tissus végétaux : l'appressorium. L'analyse morphologique, biochimique, biophysique et microscopique de trois mutants de pénétration de C. Lindemuthianum, a permis de montrer que la mise en place de l'appressorium chez ce champignon se décompose en trois étapes fonctionnelles: la différenciation, la maturation et l'acquisition de la fonctionnalité. De façon surprenante, l'analyse des réponses de défense élicitées chez le haricot par ces trois mutants montre que la maturation de l'appressorium, mais pas sa fonctionnalité, est nécessaire et suffisante pour provoquer la production d'ions superoxides, l'expression de gènes de défense (PAL3, CHS et PvPR2) et la sécrétion dans l'apoplasme de protéines PR. En revanche, la fonctionnalité de l'appressorium (e. G. La pénétration perse du tissu végétal) est nécessaire pour l'obtention d'une réaction hypersensible dans an moins trois relations gène à gène indépendantes. Deux approches de type "transcriptome" (hybridation de filtres moyenne densité a l'aide de sondes différentielles, hybridation soustractive) ont été conduites afin d'identifier des gènes potentiellement impliqués dans la mise en place de l'appressorium, et des gènes potentiellement sous le contrôle de la voie de signalisation à laquelle appartient la Serine/Threonine kinase CLK1, impliquée dans l'acquisition de la fonctionnalité de l'appressorium. Nos résultats suggèrent que la mise en place de l'appressorium chez C. Lindemuthianum nécessite la régulation i) du métabolisme des réserves carbonées, ii) de la synthèse des acides amines, iii) de l'endocytose, et iv) du contrôle du cycle cellulaire. Par ailleurs, la voie de signalisation incluant la kinase CLK1 serait impliquée dans i) le choix de la voie de dégradation des protéines (autophagie versus proteasome), ii) la régulation de l'activité mitochondriale, et iii) la réorganisation du cytosquelette via l'actine. Enfin, une approche gène candidat orthologue a été menée sur le gène MgPLS1 de Magnaporthe grisea, champignon phytopathogène qui produit un appressorium, qui code pour une tetraspanine putative impliquée dans la fonctionnalité de I'appressorium. Clpls1, le gène orthologue de C. Lindemuthianum est un homologue fonctionnel de MgPLS1 chez M. Grisea,; est également nécessaire à la fonctionnalité de l'appressorium chez C. Lindemuthianum, et plus précisément an niveau de la formation du pore appressorial.