Implication de la protéine DSP1 dans le contrôle génétique du développement embryonnaire précoce de Drosophila melanogaster

Implication of the DSP1 protein in the genetic control of early embryonic development of Drosophila melanogaster

• Auteur / Autrice : Anne Daulny
• Direction : Daniel Locker
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspect moléculaire et cellulaire en biologie
• Date : Soutenance en 2003
• Etablissement(s) : Orléans

Mots clés

Mots clés contrôlés

Foetus -- Croissance

Transcription génétique

Drosophiles

Résumé

La protéine DSP1 (''Dorsal Switch Protein 1'') de Drosophila melanogaster appartient à la famille des protéines HMGB (''High Mobility Group B''), capable de reconnaître l'ADN sans spécificité de séquence. Dans le but de comprendre la fonction biologique de la protéine DSP1, nous avons isolé au laboratoire un mutant perte de fonction de ce gène. Nous nous sommes intéressés à un trait phénotypique particulier de ce mutant : la perte partielle ou totale du quatrième segment abdominal. Par des expériences d'immunolocalisation in situ sur des embryons, nous avons montré que la perte de ce segment était corrélée à une diminution de l’expression du gène de segmentation knirps (kni). Des expériences d'interactions génétiques suggèrent que la protéine DSP1 interagit avec la protéine Bicoi͏̈d (BCD) qui est un activateur du gène kni. Nous avons confirmé in vitro l'interaction physique entre les protéines DSP1 et BCD par les méthodes de Biacore et de ''far-western''. Ces techniques ont permis de déterminer que les domaines minima nécessaires à l'interaction entre les deux protéines sont les domaines HMG de DSP1 et l’homéodomaine de BCD. Cette interaction a ensuite été mise en évidence in vivo par co-immunoprécipitation des deux protéines à partir d'un extrait protéique d'embryon de drosophile. En retardement sur gel, la protéine DSP1 n'augmente pas la liaison de BCD à ses sites de fixation sur la région régulatrice de kni. Enfin, nous avons montré en utilisant la technique d’immunoprécipitation de la chromatine pontée, que la protéine DSP1 était présente sur la région régulatrice du gène kni. L'ensemble de ces résultats suggère que la protéine DSP1 agit de concert avec la protéine BCD pour activer le gène kni en agissant comme un facteur de remodelage de la région régulatrice de ce gène.