Caractérisation moléculaire et biochimique de la protéine disulfure isomérase de Plasmodium falciparum, agent du paludisme

Molecular and biochemical characterization of the Plasmodium falciparum protein disulfide isomerase

• Auteur / Autrice : Elisabeth Mouray
• Direction : Philippe Grellier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance en 2003
• Etablissement(s) : Paris, Muséum national d'histoire naturelle
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Sciences de la nature et de l'Homme - Évolution et écologie (Paris ; 1995-....)
• Jury : Président / Présidente : Joseph Schrevel
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Mireille Moutiez, Christian Sergheraert, Philippe Grellier
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Denise Mattei, Eric Précigout

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéine disulfure isomérase

Antipaludiques

Plasmodium falciparum

Résumé

Le composé antiplasmodial DS61 a servi de ligand pour purifier par chromatographie d'affinité une protéine de 52 kDa (Pf52) dont le gène a été cloné, permettant d'identifier Pf52 comme la protéine disulfure isomérase de P. Falciparum (PfPDI). Une protéine recombinante et un immunsérum spécifique anti- PfPDI ont été produits, et PfPDI a été localisée principalement dans le réticulum endoplasmique du parasite. La protéine recombinante rPfPDI présente des activités d'oxydase/isomérase, de réductase et de chaperone identiques à celles de la PDI humaine. Pourtant, le composé DS61 inhibe l'activité oxydase/isomérase de PfPDI, mais pas celle de la PDI humaine, laissant suggérer des différences structurales entre les 2 enzymes. Les possibilités d'interactions de PfPDI avec 2 autres protéines du RE, PfBIP et PfERC, ainsi que la régulation de l'expression de PfPDI sont discutées, afin de préciser le rôle physiologique de PfPDI, et sa potentialité à représenter une nouvelle cible chimiothérapeutique

The antiplasmodial compound DS61 was used as ligand to purify by affinity chromatography a 52 kDa protein, which was identified as the plasmodial homologue of protein disulfide isomerase (PfPDI). A recombinant protein (rPfPDI) and a specific anti-PfPDI antiserum were synthetized that permit to show a main co-localization of PfPDI in the endoplasmic reticulum. The recombinant PfPDI demonstrated oxidase/isomerase, reductase activities and a chaperone behavior,. Similar to those of the human PDI, but the antiplasmodial DS61 inhibits the PfPDI oxidase/isomerase activity, but not the human one, which suggests structural discrepancies between the two enzymes. The possibilities of relationships between PfPDI and two other ER resident proteins, PfBIP and PfERC, as well as the regulation of PfPDI expression by environmental factors were analyzed, to precise the biological role of PfPDI, and to discuss about its potential as a new chemiotherapeutic target