Etude de réducteurs de la dopamine β-hydroxylase : activation et inactivation de l'enzyme

Study of reduction cofactors for dopamine beta-hydroxylase : activation and inactivation of the enzyme

• Auteur / Autrice : Patrick Slama
• Direction : Marius Réglier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie moléculaire
• Date : Soutenance en 2003
• Etablissement(s) : Aix-Marseille 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Dopamine

Quinone

Catécholamines

Monooxygénases

Résumé

La Dopamine -Hydroxylase est une enzyme à cuivre qui catalyse l'insertion d'un atome d'oxygène sur la dopamine en présence de dioxygène et d'ascorbate. L'inactivation de l'enzyme par l'ascorbate ou par l'eau oxygénée entraîne la formation d'une quinone sur la chaîne protéique. Sa présence constitue un argument en faveur de l'implication d'un radical tyrosinyle en cours de catalyse. Des études de modification du cofacteur de réduction ont été réalisées. Le superoxyde produit par la xanthine oxydase assure une bonne activité enzymatique, avec notamment une très bonne affinité pour l'enzyme. Les N-aryl-N'-hydroxyguanidines constituent une nouvelle famille de cofacteurs de réduction de la DbH. Leurs caractéristiques cinétiques ont été déterminées, et leur réactivité a été comparée avec celle obtenue en présence d'un complexe du cuivre de coordination analogue à la DbH. L'analyse de ces études suggère l'existence d'interactions spécifiques entre l'enzyme et son cofacteur de réduction

Dopamine -Hydroxylase (DbH) is a copper-containing enzyme which catalyses the insertion of an oxygen atom onto neurotransmitter dopamine. Oxygen and reducer ascorbate are requisite cofactors for this activity. Inactivation of the enzyme by either ascorbate or hydrogen peroxide generates a protein-bound quinone derivative. Its presence is in favour of the involvement of a tyrosinyl radical during catalysis. The reduction cofactor was replaced with other compounds. Xanthine oxidase-generated superoxyde enables catalytic activity, displaying a good affinity for the enzyme. N-aryl-N'-hydroxyguanidines are a new family of reduction cofactors for DbH. Their kinetic parameters were determined, and their reactivity was compared with that observed in the presence of a copper complex displaying a coordination similar to that of DbH. Consideration of these results suggests that specific interactions take place between the enzyme and its reduction cofactor.