Thèse soutenue

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Auteur / Autrice : Angélique Galvani
Direction : Linda Sperling
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques
Date : Soutenance en 2002
Etablissement(s) : Paris 11

Mots clés

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Résumé

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L'extinction génique post-transcriptionnelle, ou PTGS, est un phénomène induit après introduction d'ADN ou d'ARN double brin dans une cellule. Il se caractérise par une dégradation séquence-spécifique de tous les ARNm cellulaires homologues à l'acide nucléique étranger. Conservé des plantes aux mammifères, le PTGS constitue une réaction de défense très efficace des organismes qui peut être comparée à une sorte d'immunité génétique. Son rôle naturel serait la protection des génomes contre les éléments invasifs de type virus ou transposons. Les études effectuées jusqu'à présent ont permis de montrer que la molécule-clé permettant d'enclencher ce phénomène était de l'ARN sous forme double brin. Un des enjeux actuels consiste à comprendre comment ce type de molécule est produit après transformation par des transgènes ne présentant pas de répétition inversée en tandem. Il a été suggéré que des molécules d'ARNs de tailles aberrantes pourraient être à l'origine de la formation d'ARN double brin, en servant de matrice à une enzyme particulière : l'ARN-polymérase ARN-dépendante. L'origine de cette aberration demeure cependant inconnue. La paramécie, eucaryote unicellulaire cilié, présente également un phénomène d'extinction génique. Il se déclenche après injection dans le noyau somatique d'une grande quantité de plasmides portant uniquement la séquence codante du gène que l'on désire éteindre. Ceci aboutit à une diminution dramatique de la quantité des ARNm homologues au transgène introduit. L'une des caractéristiques de cette extinction génique est l'apparition, dans les clones éteints, d'ARNs messagers de tailles aberrantes. Mon travail de thèse a consisté dans un premier temps à mieux caractériser ce phénomène. J'ai ainsi montré qu'il s'agissait bien d'un mécanisme post-transcriptionnel pouvant être apparenté au PTGS décrit chez les autres organismes, et que des effets similaires pouvaient être observés après injection directe d'ARN double brin, ou après ingestion de bactéries produisant de l'ARN double brin. J'ai également essayé de comprendre comment étaient formées les molécules d'ARNs aberrants, afin d'en déterminer le rôle exact. Ce travail a permis de montrer que la présence dans les transgènes de la séquence 3' non codante d'un gène inhibe l'établissement du PTGS chez la paramécie. Nous avons élaboré un modèle expliquant comment l'introduction de transgènes peut déclencher ou pas l'extinction génique, via une compétition entre différentes voies métaboliques.