Dosage des métabolites phosphorylés actifs intracellulaires des inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse (INTIs) du VIH : développements analytiques et applications pharmacologiques

• Auteur / Autrice : François Becher
• Direction : Henri Benech
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie. Pharmacocinétique
• Date : Soutenance en 2002
• Etablissement(s) : Paris 5
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale du Médicament (Paris ; 2000-2010)
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (....-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Analyse

Métabolites

Phosphorylation

Nucléotides

Métabolisme

Nucléosides

Évaluation

Antirétroviraux

Inhibiteurs

Transcriptase inverse

Résumé

Un dosage par chromatographie liquide et spectrométrie de masse (CLHP-SM/SM) des métabolites phosphorylés des inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse du VIH (INTI) a été développé. La préparation de l'échantillon, la précision, la sensibilité de la méthode et son utilisation en routine ont été optimisées. La méthode a aussi été appliquée à la détermination du rapport de concentration INTI-TP/désoxynucléotide triphosphate compétiteur. Une validation approfondie du dosage de la d4T-TP et de la ddA-TP a été réalisée. . . Nous avons découvert que le métabolisme intracellulaire de l'AZT conduit à la formation de d4T-TP. Cette information permettrait de mieux comprendre la résistance croisée entre l'AZT et la d4T.

An assay for phosphorylated metabolites of nucleosidic reverse transcriptase inhibitors coupling liquid chromatography and mass spectrometry (LC-MS/MS) was developed. Sample preparation, precision, accuracy, sensitivity and routine use was improved. The method was also applied to the simultaneous determination, of the ratio NRTI-TP/competing deoxynucleotide triphosphate. The method was then fully validated for d4T-TP and ddA-TP determination according to international rules. Analysis of clinical samples allowed us to obtain information on active NRTI metabolites concentrations levels, evolution after drug dosing and inter-patient variability, on relation between plasma, intracellular concentration and immunological efficacy. We also discovered that intracellular metabolism of AZT lead to the formation of d4T-TP.