Recherche Avancée

Thèse soutenue

Approche fonctionnelle de la protéine codée par le gène de prédisposition au cancer du sein BRCA1 : identification de partenaires protéiques de sa région carboxy-terminale BRCT

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Auteur / Autrice : Clémence Magnard
Direction : Gilbert Lenoir
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Médecine
Date : Soutenance en 2002
Etablissement(s) : Lyon 1

Résumé

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Mon sujet de thèse a pour objet la protéine codée par le gène majeur de prédisposition au cancer du sein BRCA1. Lorsque j'ai débuté ma thèse, cette protéine étudiée depuis peu semblait impliquée dans différents mécanismes cellulaires tels le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et la réparation de l'ADN. Afin de préciser son rôle biologique, l'objectif de mon travail a été de rechercher des partenaires protéiques de l'un de ses domaines fonctionnels connus : le domaine BRCT (BRCA1 c-terminus). La technique de cosédimentation de lysats cellulaires avec des protéines de fusion à la GST m'a permis d'identifier un premier partenaire majeur du domaine BRCT de la protéine Brca1 murine. Il s'agit d'une protéine cytoplasmique, l'acétyl-coA carboxylase a, enzyme clé du métabolisme des acides gras. L'interaction de l'ACCa avec BRCA1 a été confirmée in vitro et in vivo, et est conservée chez la souris et chez l'homme. J'ai également pu montrer que la présence simultanée des deux modules du domaine BRCT est requise pour la liaison de l'ACCa sur BRCA1, et que des mutations prédisposant au cancer situées dans cette région abolissent l'interaction de BRCA1 avec l'ACCa. Un criblage en deux-hybride chez la levure m'a également permis d'isoler neuf partenaires potentiels du domaine BRCT de Brca1. A ce jour, l'interaction de trois d'entre eux avec la protéine BRCA1 a pu être confirmée in vitro et in vivo. Il s'agit de la protéine de liaison aux queues poly(A) des ARN messagers PABP, du répresseur de la traduction NAT1 ou eIF4G2 et de la protéine à empreinte parentale PEG10. Au total, l'identification de ces partenaires de la protéine BRCA1 dévoile des facettes inattendues de sa fonction et ouvre de nouvelles perspectives pour l'étude de l'implication de BRCA1 dans la tumorigenèse de la glande mammaire.