Protéome épididymaire, mise en évidence de protéases et rôle dans la maturation post-gonadique des spermatozoi͏̈des

Epididymal proteome, presence and role of proteases

• Auteur / Autrice : Sonia Metayer-Coustard
• Direction : Jean-Luc Gatti
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Tours

Mots clés

Mots clés contrôlés

Peptidases

Conduit épididymaire

Spermatozoïdes

Résumé

Chez les mammifères, à la sortie des testicules les spermatozoi͏̈des sont fonctionnellement immatures. Ils acquièrent leur pouvoir fécondant au cours de leur transit dans l'épididyme. Durant ce transit, la composition de la membrane plasmique des spermatozoi͏̈des subit d'importants changements qui résultent d'interactions avec le fluide épididymaire. Parmi ces modifications, les remaniements des protéines de surface, résultats de processus protéolytiques ou d'intégration de nouvelles protéines, jouent un rôle majeur dans l'apparition du pouvoir fécondant. Nous avons recherché les protéines qui pourraient participer à la maturation des gamètes et particulièrement à ces remaniements de la membrane plasmique. La caractérisation des protéines majeures du fluide épididymaire par analyse protéomique a montré des distribution de protéines et des profils de sécrétion variables d'une région à l'autre dans l'épididyme d'étalon. Parmi ces protéines, de nombreuses protéases (MMP-2, -3, -9, acrosine) et plusieurs inhibiteurs de protéases (α-2-macroglobuline et TIMP-2) ont été mis en évidence. Ces composés sont aussi retrouvés dans les fluides épididymaires de bélier et de verrat. Le rôle de ces protéases du fluide a été abordé par l'étude de la libération de la forme germinale de l'enzyme de conversion de l'angiotensine-I (ECA). In vivo, cet enzyme est libéré des spermatozoi͏̈des testiculaires dans le fluide de la région antérieure de l'épididyme par un mécanisme de protéolyse. Nous avons montrés que le facteur responsable pourrait être une sérine-protéase présente dans le fluide de cette région épididymaire. Nous avons aussi caractérisé enzymologiquement l'isoforme soluble de l'ECAg et analysé son rôle dans le pouvoir fécondant des spermatozoi͏̈des de bélier. Enfin, nous avons montré que la protéine prion (PrPc) est synthétisée et sécrétée sous différentes formes glycosylées et protéolysées dans l'épididyme de bélier. Au cours de l'éjaculation cette protéine s'intègre dans la membrane des spermatozoi͏̈des après une coupure protéolytique de sa partie C-terminale.