Regulation du cycle cellulaire et de la morphologie cellulaire par les kinases de la nouvelle famille cak1 et par xbp1, represseur de l'expression des genes clb

• Auteur / Autrice : CHAOUKI MILED
• Direction : CARL MANN
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Les cellules de levure subissent des transformations morphologiques en reponse a divers signaux environnementaux. Un tel evenement, appele differentiation pseudohyphale, intervient, lorsque les cellules diploides sont carencees en azote en milieu agar solide. Les cellules carencees s'allongent et une petite fraction forme des filaments qui penetrent dans l'agar. Les bases moleculaires des changements de la morphologie cellulaire et du cycle cellulaire en reponse a une carence en azote sont tres peu definies, en partie parce que les conditions de croissance heterogenes des cellules carencees en milieu agar solide ne sont pas maniables pour les analyses biochimiques. Dans ce travail, nous avons utilise des cultures en chemostats pour etudier le role des regulateurs du cycle cellulaire vis-a-vis de la differentiation cellulaire en reponse a une carence en azote, en utilisant des conditions de culture homogenes controlees. Nous avons trouve que les niveaux des cyclines clb1, clb2 et clb5 sont reduits en milieu carence en azote en chemostat compares aux cultures en milieu riche. D'autre part le represseur transcriptionnel xbp1 est fortement induit dans ces conditions. En outre, la deletion de xbp 1 inhibe l'elongation cellulaire et la croissance pseudohyphale en milieu carence en azote. La deletion de clb2 restaure l'elongation cellulaire et la filamentation du mutant xbp1 en reponse a une carence en azote. L'activation transcriptionnelle de xbp 1 et consequement la repression de l'expression des genes clb sont une reponse cle des cellules de s. Cerevisae a une carence en azote. Chez candida albicans, les bases moleculaires de la regulation de la differentiation filamenteuse en reponse a une temperature de 37\c sont inconnues. Nos resultats suggerent que la temperature de 37\c reduit la phosphorylation activatrice de cdc28 par cak1, que nous avons identifiee et classee dans une nouvelle famille de kinases specifiques aux champignons. La proteine cak1 constitue une cible pour des antifongiques contre le pathogene humain c. Albicans.