Etude de fhl1p. Un regulateur transcriptionnel de la famille fork head chez la levure saccharomyces cerevisiae

• Auteur / Autrice : Tatiana Gorojankina
• Direction : Monique Bolotin-Fukuhara
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 11

Résumé

Le sujet du travail est l'etude d'un facteur transcriptionnel potentiel de la levure saccharomyces cerevisiae appele fh11p. Le gene fhl1 a ete clone comme supresseur multicopie d'une mutation thermosensible de la sous-unite c160 de l'arn polymerase iii. La deletion de fhl1 conduit a une croissance tres lente et a un defaut de maturation des arn ribosomaux. Fh11p contient le domaine fork head, caracteristique d'une famille d'activateurs transcriptionnels impliques dans la differenciation et la specialisation des tissus chez les eucaryotes multicellulaires. Chez la levure la fonction des facteurs fork head n'etait pas connue. L'utilisation d'une banque de fusions traductionnelles entre les genes de s. Cerevisiae et le gene lacz d'e. Coli nous a permis de trouver quelques genes cibles potentiels de fh11p parmi lesquels deux genes codant pour les proteines ribosomales rp16bp et rp112ap. La transcription de ces deux genes est en effet fortement diminuee dans la souche fhl1 : : his3. Nous avons par ailleurs introduit le tag ha dans la region c-terminale de fh11p afin de suivre la localisation cellulaire des diverses versions deletees de la proteine, et mmunolocalisation indirecte montre que fh11p est localisee dans le noyau. Enfin une etude fonctionnelle des differents domaines de la proteine a ete entreprise. Elle montre que le domaine c-terminal est necessaire pour la localisation correcte de la proteine. Mais le domaine fha, potentiellement le domaine d'interaction proteine-proteine, semble etre fonctionnellement le plus important pour la croissance normale des cellules, pour la maturation de la sous-unite 60s du ribosome et pour l'activation transcriptionnelle. L'ensemble des resultats obtenus confirme la fonction de fh11p comme facteur transcriptionnel et permet de proposer et de discuter une hypothese de fonctionnement de fh11p.