Recherche et caracterisation de nouveaux chaperons et de molecules de stress chez escherichia coli

• Auteur / Autrice : THERESE CALDAS
• Direction : Gilbert Richarme
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Le stress thermique, chez les bacteries, se caracterise par l'augmentation de l'expression d'un groupe de proteines, les proteines de choc thermique. La plupart des proteines qui constituent cette classe sont des chaperons moleculaires, impliquees dans le repliement des proteines, leur adressage, leur renaturation lors d'un stress et le controle des interactions proteine/proteine. Les chaperons moleculaires fixent, de facon transitoire, les formes natives de la plupart des proteines cellulaires. Ils interagissent avec leurs substrats en reconnaissant des regions hydrophobes exposees sur les proteines depliees. Notre travail s'est concentre sur la recherche et la caracterisation de facteurs de solubilisation des proteines et de molecules de stress chez escherichia coli. Dans une premiere partie, nous avons demontre les proprietes chaperons des facteurs de traduction ef-tu, ef-g et if2. Ces facteurs presentent des proprietes caracteristiques des proteines chaperons et une activite chaperon in vitro comparable a celle de dnak. D'autre part, nous avons demontre que des petites molecules comme la glycine betaine, et son precurseur metabolique, la choline, connues pour etre fortement accumulees lors d'un choc hyperosmotique, agissent aussi comme thermoprotectant. Elles protegent les proteines de la thermodenaturation in vitro. In vivo, la glycine betaine et la choline compensent la perte de viabilite d'un mutant dnak a 42\c. Par ailleurs, en combinant les analyses informatiques et les techniques biochimiques, nous avons decouvert la fonction de la proteine de choc thermique ftsj : methyltansferase du rna ribosomal 23s (nucleotide um 2 5 5 2). Nous avons montre que la souche mutante ftsj presente une capacite traductionnelle reduite