Etude des mecanismes de regulation de l'activation des integrines 2 cd11b/cd18 des polynucleaires neutrophiles

• Auteur / Autrice : Éric Blouin
• Direction : Lise Halbwachs-Mecarelli
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Les neutrophiles sont les premiers leucocytes a acceder au site inflammatoire. C'est l'adherence, via les integrines 2, qui leur permet d'assurer leurs fonctions. Les mecanismes d'activation de ces integrines sont mal connus. Cette etude analyse donc le role de l'oxydoreduction dans l'activation des integrines 2 des neutrophiles. Nous montrons que les oxydants activent les integrines 2, se traduisant par l'adherence des neutrophiles et l'apparition de la conformation active des integrines. Cette activation implique les tyrosine kinases et la formation de ponts disulfure. Ensuite, le dpi (diphenyleneiodonium) et les piegeurs de radicaux libres inhibent l'adherence et l'apparition de la conformation active des integrines 2, induite apres la stimulation des neutrophiles par le tnf-. L'oxydase impliquee dans le mecanisme n'est pas la nadph-oxydase, puisque les memes resultats sont retrouves avec les neutrophiles de patients cgd (granulomatose septique chronique). Le pp2, inhibiteur specifique des kinases src, bloque l'adherence des neutrophiles et l'apparition de la conformation active des integrines 2 induite par le tnf-. Parmi les kinases src, seules les kinases fgr sont activees par le tnf- et ceci de facon dependante de l'oxydoreduction, car inhibee par le dpi et les piegeurs de radicaux libres. De la meme facon, le sb203580, inhibiteur specifique des map kinases p38, bloque l'adherence des neutrophiles et l'apparition de la conformation active des integrines 2 induite par le tnf-. Cette activation est regulee de facon dependante de l'oxydoreduction, car elle est bloquee par le dpi et les piegeurs de radicaux libres. Nous avons donc mis en evidence un nouveau mecanisme de regulation de l'activation des integrines 2, impliquant la stimulation d'une oxydase, differente de la nadph-oxydase, qui modifie le potentiel d'oxydoreduction du neutrophile, entrainant l'oxydation de groupements thiols et l'activation des kinases p38 et fgr.