Fonction(s) du complexe ctd kinase i de s. Cerevisiae et analyse du mecanisme atypique de regulation de son activite

• Auteur / Autrice : GUILLAUME HAUTBERGUE
• Direction : Valérie Goguel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

L'etat de phosphorylation du ctd (carboxy-terminal domain) de l'arn polymerase ii joue un role essentiel au cours de la synthese des arn messagers (transcription et maturation). Quatre activites ctd kinases ont ete caracterisees chez la levure saccharomyces cerevisiae. Parmi celles-ci, le complexe ctdk-i (ctd kinase i) est compose de trois sous-unites : une kinase de type cdk (cyclin-dependent kinase) ctk1, une cycline de type c ctk2, et inhabituellement pour un complexe de type cdk, un troisieme facteur ctk3 de fonction inconnue. Au cours de ce travail, nous avons decrit que le complexe ctdk-i joue des roles pleiotropiques dans la regulation de la transcription des genes de classe ii. Nous avons montre pour la premiere fois qu'une cycline de type c, cyclines specifiques des ctd kinases, est phosphorylee et rapidement degradee par le systeme ubiquitine/proteasome, comme ce qui a ete decrit pour les cyclines de phase g1. La sous-unite ctk3 est egalement ubiquitinylee et degradee par le proteasome. In vivo, les proteines ctk2 et ctk3 co-immunoprecipitent, et leur interaction conduit a la formation d'heterodimeres stables in vitro. Nous proposons que l'interaction directe de ces deux facteurs masque leurs domaines respectifs de degradation, empechant ainsi leur destruction rapide par le systeme ubiquitine/proteasome. De plus, les deux sous-unites regulatrices ctk2 et ctk3 sont requises in vitro pour l'activation de la ctd kinase ctk1, et nous proposons que le facteur ctk3 joue le role d'une co-cycline. Contrairement aux autres complexes de type cdk, les mecanismes de degradation des proteines ctk2 et ctk3 ne dependent ni de l'activite ni de l'interaction de leur kinase associee. Il semble que la kinase sgv1, une autre ctd kinase, serait impliquee dans la phosphorylation de la cycline ctk2. De facon tres interessante, ces resultats preliminaires suggerent que la regulation de l'expression genique fasse appel a l'interconnexion de l'activite de deux ctd kinases.