Activité superoxyde réductase : mise en évidence d'une nouvelle activité enzymatique impliquée dans la lutte contre le stress superoxyde

• Auteur / Autrice : Murielle Lombard
• Direction : Marc Fontecave
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie
• Date : Soutenance en 2001
• Etablissement(s) : Université Joseph Fourier (Grenoble ; 1971-2015)

Mots clés

Mots clés libres

Biochimie analytique. Structurale et metabolique

Hyperoxyde

Oxidoreductases

Bacterie sulfatoreductrice

Archaeobacteria

Rubredoxine

Activite enzymatique

Relation structure activite

Treponema pallidum

Stress

Intermediaire reaction

Résumé

La rubredoxine oxydoreductase (rbo), ou desulfoferrodoxine (dfx) est une proteine homodimerique de 2 x 14 kda, presentes chez de nombreuses bacteries sulfato-reductrices (genre desulfovibrio) et chez quelques archaebacteries. Elle possede deux centres metalliques non heminiques par sous-unite, un centre de type rubredoxine et un centre fe(nhis) 4(scys). Toutes les experiences realisees (test sod, etudes de reactivite avec o 2 o et h 2o 2, radiolyse gamma) ont montre que le centre fe(nhis) 4(scys) est responsable de l'activite superoxyde reductase (sor) de l'enzyme. Par radiolyse pulsee, deux intermediaires reactionnels ont ete mis en evidence pouvant correspondre a des especes dee type fer-peroxyde. D'autre part, deux residus proches du site actif ont ete mutes chez la sor de desulfoarculus baarsii : le residu glutamate 47 (glu-ala) et le residu lysine 48 (lys-ileu). La mutation lys-ileu induit une diminution d'un facteur 20 de la reactivite avec o 2 o et la mutation glu-ala stabiliserait un intermediaire fer-peroxyde. Une autre classe de sor a ete etudiee, celle de treponema pallidum, un organisme microaerophile sans sod ni catalase. Le centre de type rubredoxine est absent. La proteine presente la meme activite sor. L'activite sor pourrait representer une nouvelle strategie dans la lutte contre le stress superoxyde.