Implication de l'activite phosphoinositide 3-kinase dans la proliferation des cellules musculaires lisses d'aorte de porc - identification d'une phosphoinositide 3-kinase nucleaire de type

• Auteur / Autrice : DANIEL BACQUEVILLE
• Direction : Monique Breton Douillon
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Résumé

La proliferation des cellules musculaires lisses (cmls) joue un role crucial dans la pathogenese de l'atherosclerose et de la restenose. Toutefois, les mecanismes moleculaires responsables de cette croissance cellulaire sont peu connus. Recemment, l'activite phosphoinositide 3-kinase (pi3k) a ete impliquee dans les voies de transduction du signal mitogene. Cette lipide kinase phosphoryle la position d3 du noyau inositol des phosphoinositides pour produire les 3-phosphoinositides (3-pis), seconds messagers intracellulaires. Nous nous sommes interesses a la relation entre activite pi3k et controle du cycle cellulaire dans des cmls isolees d'aorte de porc. Nous avons montre que le ly294002 et la wortmannine, inhibiteurs de pi3k, inhibent la synthese d'adn induite par le serum. Des etudes de cinetique ont revele un blocage de la proliferation en phase g 1 tardive, environ 6 h avant la transition g 1/s (point pi3k). L'arret du cycle est correle a une reduction de l'expression et de l'activite de la kinase dependante des cyclines, cdk2, et au maintien de l'expression de p27 k i p l, inhibiteur de cdks. Un travail preliminaire semble indiquer que les voies mitogen-activated protein kinases et p70s6 kinase sont en aval du point pi3k. Nous avons aussi recherche l'existence d'une pi3k nucleaire dans les cmls. Nous avons montre la presence d'une pi3k de type , de 117 kda, capable de phosphoryler un stock intranucleaire de pi(4,5)p 2 pour former du pi(3,4,5)p 3. Cette enzyme, sensible aux inhibiteurs de pi3k, est specifiquement activee par le gtps et depend partiellement des proteines g 1/g 0. Enfin, nous avons identifie deux cibles potentielles du pi(3,4,5)p 3 nucleaire : les serine/threonine kinases pkc et akt. Nos resultats montrent un role critique de l'activite pi3k dans la proliferation des cmls et l'existence d'un metabolisme nucleaire des 3-pis. Ils ouvrent de nouvelles perspectives therapeutiques dans le traitement de la restenose et de l'atherosclerose.