Contribution à l'étude des mécanismes de régulation de la biosynthèse des neurostéroïdes : effets des endozépines et du GABA

• Auteur / Autrice : Marie Jean Luc Do Rego
• Direction : Hubert Vaudry
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Rouen

Mots clés

Mots clés contrôlés

Récepteurs GABA

Immunocytochimie

Endozépines

GABA

Mots clés libres

Biosynthèse

Gaba

Encéphale

3(or 17)-hydroxystéroïd déhydrogénase

Activité enzymatique

Grenouille

Récepteur gabaergique A

Peptide DBI

Immunohistochimie

Neurostéroïde

Endozépine

Résumé

Nous avons récemment démontré qu'une enzyme clé de la stéroïdogénèse, la 3-hydroxystéroïde deshydrogénase (3-HSD) est exprimée dans le diencéphale de la grenouille et nous avons montré que les explants hypothalamiques synthétisent plusieurs neurostéroïdes. Dans la présente étude, nous avons recherché les effets de deux endozépines, le TTN et l'ODN ainsi que les effets du GABA sur l'activité de la 3-HSD dans le cerveau. Des expériences de double marquage révèlent que les neurones hypothalamiques 3-HSD-positifs contiennent également les récepteurs des benzodiazépines de type périphérique (PBR) ainsi que les sous-unités α3, β2 et/ou β3 des récepteurs GABA A. Nous avons aussi observé que les cellules gliales ODN-immunoréactives jouxtent les neurones 3-HSD-positifs. L'incubation d'explants hypothalamique en présence du TTN induit une stimulation de la production de 17OH-delta5P, 17OH-P et d'un nouveau stéroïde. L'effet du TTN est mimé par le Ro5-4864, un agoniste des PBR, et réduit par le PK11195, un antagoniste des PBR. Nous avons ensuite observé que l'ODN, un ligand endogène des récepteurs des benzodiazépines de type central (CBR), stimule également la biosynthèse des neurostéroïdes. Les β-carbolines β-CCM et DMCM, deux agonistes inverses des CBR, miment l'effet de l'ODN, alors que le flumazénil, un antagoniste des CBR réduit significativement l'effet de l'ODN, du β-CCM et du DMCM. Enfin, le GABA induit une inhibition dose-dépendante de la formation des stéroïdes dans le cerveau. L'effet du GABA est mimé par le muscimol, un agoniste des récepteurs GABA A, et bloqué par la bicuculline et le SR95531, deux antagonistes des récepteurs GABA A. En revanche, le baclofène, un agoniste des récepteurs GABA B, n'a aucun effet sur la synthèse des neurostéroïdes. L'ensemble de ces données démontre pour la première fois que l'activité biologique de la 3β-HSD et du cytochrome P450 C17 dans le système nerveux central des vertébrés est régulée par les endozépines et le GABA via les PBR et les récepteurs GABA A.