Recherche Avancée

Thèse soutenue

Etude du site et du mode de liaison des inhibiteurs du transporteur neuronal de la dopamine ; caractérisation et utilisation d'un inhibiteur irréversible afin de mesurer la vitesse de renouvellement du transporteur

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Auteur / Autrice : Marie Jean-Claude Do Rego
Direction : Jean-Jacques Bonnet
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
Date : Soutenance en 2000
Etablissement(s) : Rouen

Résumé

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Le transporteur neuronal de la dopamine (TDA), un élément fonctionnel impliqué dans la régulation synaptique de la dopamine (DA), constitue la cible moléculaire des drogues comme la cocaïne et ses dérivés. Le but du présent travail est d'élucider les mécanismes impliqués dans le fonctionnement du TDA, en vue d'identifier le type de molécule capable de s'opposer à la liaison des drogues sur ce dernier. Pour ce faire, nous avons caractérisé in vitro et in vivo le pouvoir inhibiteur irréversible du DEEP-NCS et l'avons utilisé pour mesurer la vitesse de renouvellement du TDA, qui est d'environ 6 jours. Il n'y a pas de modification du contenu en ARNm du TDA au décours de son inactivation par le DEEP-NCS. Ces résultats démontrent que la vitesse de renouvellement du TDA mesurée dans la présente étude pourrait être celle qui prévaut dans les conditions physiologiques. Nous avons comparé par la suite la capacité des inhibiteurs et des substrats du TDA à protéger la liaison d'un analogue de la cocaïne, le WIN 35,428, vis-à-vis des effets alkylants du N-éthylmaléimide, et avons montré qu'il existe une distinction entre les sites de liaison de ces deux groupes d'agents pharmacologiques. Enfin, nous avons déterminé le mode de liaison d'un inhibiteur spécifique et puissant du TDA, le GBR 12783, un agent dont la liaison sur le TDA s'oppose à celle de la cocaïne. Nous avons donc pour la première fois montré que le GBR 12783 se lie sur le TDA en deux étapes consécutives, avec une deuxième étape qui conduit lentement à la formation d'un complexe TDA-GBR 12783 stable. Le GBR 12783 constitue donc le prototype à partir duquel des agents bloquant la liaison de la cocaïne sur sa cible moléculaire pourrait être développés. En conclusion, ce travail fournit des informations sur les données fonctionnelles et pharmacologiques du TDA, pouvant aider à la conception de produits efficaces contre la cocaïnomanie.