Role des antiports na +/h + dans la physiologie et la virulence de vibrio cholerae o1

• Auteur / Autrice : SOPHIE VIMONT
• Direction : Patrick Berche
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Vibrio cholerae, l'agent du cholera est une bacterie halotolerante capable de survivre dans les environnements sales. Chez escherichia coli, l'expulsion du sodium est liee a un flux de h + via un antiport na +/h + qui permet de maintenir un gradient de na + sur une large gamme de concentration de na + extracellulaire. L'extrusion du na + jouerait egalement un role dans la regulation du ph intracytoplasmique. Le but de ce travail etait d'etudier le role des antiports na + /h + dans la survie et la virulence de v. Cholerae. En effet, de tels mecanismes doivent permettre a la bacterie de maintenir son homeostasie intracellulaire (na + et ph) en fonction des variations de son environnement. Nous avons etudie 3 antiports de v. Cholerae : nhaa, nhab et nhad. Nous avons montre que ces trois proteines ont une fonction antiport na +(li +)/h + en restaurant la croissance d'un mutant nhaab, chaa de e. Coli en milieu sale (0,2m nacl, ph 7,5, et 0,01m licl, ph 7,5). Les genes nhaa, nhab et nhad ont ete inactives et l'etude de la croissance des mutants a ete realisee en presence de na + et de li +. Un mutant nhaa ne pousse plus en licl 120 mm a ph 8,5. Il en est de meme pour les mutants nhaab, nhaad et nhaabd. En revanche, a la difference des mutants nhaa ou nhaab de e. Coli, les mutants nhaa, nhab, nhad, nhaab, nhaad, nhabd et nhaabd de v. Cholerae continuent de croitre a differentes concentrations de nacl. L'inactivation des antiports n'entraine pas de difference de virulence chez le souriceau. L'absence de phenotype de ces mutants suggere qu'il existerait d'autres antiports na +/h +. L'analyse recente de la sequence complete du genome de la bacterie a permis de mettre en evidence la presence de 3 autres antiports putatifs : yqki, nhap, nhac-1. Notre travail constitue la premiere etude des antiports de v. Cholerae. Une etude plus complete du cycle du na + permettrait de mieux comprendre les facteurs qui contribuent a sa survie dans l'environnement et au cours du processus infectieux chez l'hote.