Etude fonctionnelle de la sous-unite 131 du facteur de transcription tfiiic chez la levure saccharomyces cerevisi
Auteur / Autrice : | HELENE DUMAY |
Direction : | Christian Marck |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques fondamentales et appliquées |
Date : | Soutenance en 2000 |
Etablissement(s) : | Paris 7 |
Résumé
Chez la levure saccharomyces cerevisi, l'etape cle de la construction du complexe de pre-initiation de la transcription iii est le recrutement du facteur tfiiib par le facteur tfiiic prealablement fixe sur les promoteurs partiellement ou totalement intrageniques. Tfiiic est un complexe de 600 kda compose de six sous-unites : 138, 131, 95, 91, 60, 55. La sous-unite 131 (1024 acides amines) possede 11 motifs tpr (tetratricopeptide repeat) et joue un role essentiel dans l'assemblage du complexe tfiiib_tfiiic_adnt en etablissant une interaction avec la sous-unite tfiiib70. L'objectif de ce travail etait de mieux comprendre les differentes fonctions de tfiiic en etudiant la sous-unite 131 et en recherchant plus particulierement de nouveaux partenaires d'interaction. Nous avons tout d'abord montre que 131 pouvait interagir in vivo et in vitro avec la sous-unite abc10, commune aux trois arn polymerases. L'existence d'un mutant de abc10 deficient pour la transcription iii et altere dans son interaction avec 131 suggere l'importance d'un eventuel contact entre le facteur tfiiic et l'arn polymerase iii. La recherche de partenaires de 131, faite ensuite sur l'ensemble du genome, nous a permis d'identifier deux nouvelles proteines : sth1 et rsc2 qui sont des composants du complexe rsc de remodelage de la chromatine. Des experiences d'immunoprecipitation ont permis d'etablir que, in vivo, tfiiic, rsc et l'arn polymerase iii peuvent coexister au sein d'un meme complexe. De plus l'etude des transcrits de souches mutantes pour rsc suggere que ce complexe est implique dans la transcription de classe iii. Enfin, l'etude biochimique et genetique du mutant 131-tpr2 nous a permis de montrer que 131 interagit aussi avec la sous-unite tfiiib90 et participe a son assemblage lors de la derniere etape de la construction du complexe de pre-initiation de la transcription. Ces resultats soulignent l'importance des contacts engages par 131 dans les differents roles de tfiiic.