Interactions entre un oligonucleotide et un derive cationique de l'amphotericine b en presence de modeles membranaires, dans le but d'une vectorisation d'oligonucleotides

• Auteur / Autrice : ISABELLE BLANC SEKSEK
• Direction : Michèle Saint-Pierre-Chazalet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences médicales
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

Les strategies anti-gene et antisens visent a inhiber la synthese d'une proteine qui entrave le bon fonctionnement de la cellule au moyen de courts fragments nucleotidiques, les oligodesoxyribonucleotides (odn). Bien que prometteuses, ces nouvelles approches therapeutiques voient leur developpement limite en raison de la carence en vecteurs efficaces pour l'internalisation des odn dans les cellules. Notre laboratoire propose un nouveau vecteur d'odn, l'ama, une molecule poyenique cationique derivee de l'amphotericine b. Nous nous interessons ici aux fondements physico-chimiques des interactions entre l'ama et l'odn, ainsi qu'au(x) mecanisme(s) possible(s) d'internalisation de l'odn vectorise par l'ama a travers des membranes modeles. L'etude des interactions entre l'odn et l'ama en solution par spectroscopie d'absorption et dichroisme circulaire a montre que l'odn modifie l'etat d'auto-association du polyene en solution. Ces effets dependent etroitement des concentrations en ama et en odn ainsi que de la force ionique du milieu. Les solutions odn/ama observees en microscopie electronique revelent des especes complexes de structure variable selon le rapport de charges / + (charges negatives de l'odn/charges positives de l'ama), suggerant une interaction cooperative entre les deux molecules et de nature double : electrostatique et hydrophobe. L'etude du comportement des complexes odn/ama en presence de membranes modeles simplifiees (monocouches lipidiques planes et vesicules lipidiques) a montre que les complexes ont peu d'affinite pour les lipides. Une interaction competitive s'etablirait entre ama-lipides d'une part, et ama-odn d'autre part. Il apparait enfin que la complexation de l'ama a l'odn ne modifie pas l'affinite