Synthèse chimio-enzymatique de néoglycopeptides : une nouvelle approche convergente

A novel convergent approach towards the chemo-enzymatic synthesis of neoglycopeptides

• Auteur / Autrice : Delphine Ramos
• Direction : Patrick Rollin, Werner Klaffke
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Chimie et physicochimie des composés d'intérêt biologique
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Orléans

Mots clés

Mots clés contrôlés

Facteur XIII

Glycopeptides

Résumé

Les interactions cellulaires contrôlées par les glycostructures conditionnent le bon fonctionnement de l'organisme. De telles structures servent aussi de point d'ancrage à des organismes pathogènes néfastes à la cellule-hôte. Ces deux fonctions expliquent l'utilisation de telles structures pour des applications biomédicales, d'où le besoin évident d'un accès illimité et facile à une bibliothèque de structures glycopeptidiques. Idéalement, le saccharide et le peptide seraient préparés en parallèle, ce qui nécessite des méthodes de conjugaison chimique ou enzymatique hautement spécifiques. La glutaminyl-peptide y-glutamyl transférase microbienne ou transglutaminase (TGase), catalyse la réaction de transfert d'acyle conduisant à la polymérisation ou à la conjugaison de protéines. La TGase est très spécifique à l'égard du groupe y-carboxamide de la glutamine, servant de donneur d'acyle, mais elle accepte par contre un grand nombre d'amines primaires comme accepteurs d'acyle. Ceci nous a permis d'utiliser cette enzyme pour la construction de cibles synthétiques, des néoglycopeptides. Une procédure régiosélective pour la synthèse de N-néoglycopeptides a été développée. La séquence consiste en 1) une N-glycosylation, 2) un couplage photo-induit de la cystéamine et 3) une transacylation catalysée par la transglutaminase. Des composés modèles tels que la GlcNac, le maltose, le cellobiose et le lactose ont été convertis avec succès en leurs néoglycopeptides respectifs, le peptide Z-Gln-Gly servant de partenaire dans la conjugaison enzymatique. La position anomère étant protégée (N-acétyl-allyl), le saccharide peut aisément subir des manipulations avant que le ligand soit équipé de son espaceur portant une fonction amine terminale. Un trisaccharide possédant une terminaison a-(1-3)-Gal a été synthétisé, puis couplé de manière photochimique à la cystéamine et enfin conjugué de façon enzymatique au peptide synthétique modèle, pour conduire à un néoglycopeptide.