Etude des modifications biochimiques de l'albumen des graines de cacaoyer (Theobroma cacao L. ) au cours de leur développement. Application à l'amélioration de l'embryogénèse somatique

• Auteur / Autrice : Justine Sossou-Dangou
• Direction : Claude Teisson
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiologie
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Montpellier 2

Mots clés

Mots clés contrôlés

Embryologie

Semences

Développement

Cytochimie

Clones (biologie)

Cultures cellulaires

Biotechnologie

Cacaoyer

Résumé

Le cacaoyer (theobroma cacao l. ) est une plante perenne dont les programmes de selection sont tres longs. L'embryogenese somatique a partir des tissus sporophytiques represente une voie interessante par laquelle on peut esperer multiplier rapidement des clones elites. Le milieu de culture est un facteur determinant pour la reussite de l'embryogenese somatique. Ce travail a ete entrepris dans le but d'ameliorer les milieux de culture pour la regeneration d'embryons somatiques, prenant comme modele de reference la graine de cacaoyer, une graine exalbuminee. L'etude histocytologique de l'ontogenese des embryons et l'analyse de l'albumen de quelques stades de developpement de la graine ont fait l'objet de la premiere partie de ce travail. Quatre stades ont ete observes : i (embryon globulaire), i-ii (embryon cordiforme), ii (embryon cotyledonaire) et iii (embryon cotyledonaire en croissance). Il a ete observe que l'albumen cellulaire qui entoure l'embryon commence a degenerer au stade i-ii, au debut de la mise en place de la symetrie bilaterale chez l'embryon. Les resultats obtenus a partir des analyses montrent que l'albumen de cacaoyer est similaire aux autres albumens par sa richesse en acides amines, acide malique, phosphates, sulfates, aia, ipa, zeatine, et zeatine-riboside. Il presente cependant deux particularites, a savoir la preponderance des sucres reducteurs glucose et fructose qui representent 90% des sucres solubles, l'absence d'acides amines soufres la cysteine et la methionine. Deux phases ont ete distinguees. La phase 1 ou la symetrie bilaterale de l'embryon n'est pas encore en place (stade i et i-ii). Pendant cette phase, les sucres solubles, ammonium, phosphates, aia, ipa et zeatine-riboside sont a leur taux le plus eleve, alors que ceux des acides amines, du potassium et du magnesium sont faibles. A la seconde phase, la symetrie bilaterale est mis en place, et l'embryon est en croissance. Les taux de sucres solubles, d'ammonium, de phosphates, d'aia, d'ipa, de zeatine-riboside diminuent, et ceux du potassium, magnesium, des acides amines augmente. Ces derniers taux ont ete appliques a la croissance des embryons. D les resultats de l'analyse de l'albumen ont servi de base pour la formulation de nouveaux milieux de culture. Ceux-ci sont proposes en modifiant un seul element dans les milieux temoins. De tous ces milieux seuls ceux contenant la zeatine ou l'aia ont ete efficaces. La zeatine a ameliore de facon significative le taux d'embryogenese somatique des staminodes de deux clones etudies, et celui des cotyledons d'un clone. L'aia a augmente significativement le taux d'embryogenese somatique des cotyledons d'un clone.