La glande digestive de la coquille Saint-Jacques Pecten Maximus : caractérisation fonctionnelle et mise en place d'un nouveau modèle in vitro

• Auteur / Autrice : Gaël lannig Le Pennec
• Direction : Germaine Dorange
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Brest

Résumé

Nous avons etabli un modele de culture primaire d'acini digestif a partir de la glande digestive du mollusque bivalve pecten maximus par dissociation enzymatique et decontamination de l'organe par perfusion in situ. Les valeurs et limites de ce bioessai ont ete definies. Une etude preliminaire de l'organe au plan structural et fonctionnel a ete entreprise ainsi qu'une selection de marqueurs fonctionnels et d'outils moleculaires caracteristiques d'evenements decrits lors de l'etude histologique. L'adipogenese et certains phenomenes associes ont ete suivis par northern blot au cours d'une annee. Les enzymes etudies sont : la glycerophosphate deshydrogenase, l'actine, l'aldolase et la cycline b, sur les memes echantillons que ceux analyses au plan histologique. Au niveau de l'organe, nous avons etabli, correlativement a une diminution des arn transcrits de l'actine, une augmentation de ceux de la gpd et de l'aldolase, associee a une surcharge lipidique des acini digestifs ainsi qu'une coordination dans la regulation de plusieurs genes impliques dans des fonctions distinctes : organisation du cytosquelette, metabolisme des lipides et des sucres en relation avec les blooms phytoplanctoniques en rade de brest et l'-amylase. Nous avons etudie grace a la cycline b les periodes de l'annee propices au developpement de cultures de cellules proliferatives. Ces marqueurs permettront de suivre la stabilite fonctionnelle des acini digestifs in vitro, dans les conditions actuellement definies et en presence de xenobiotiques. Les premiers essais de stimulations des acini par des xenobiotiques montrent que ce bioessai est satisfaisant pour des etudes en ecotoxicologie. Les resultats obtenus ouvrent des perspectives multiples dans le domaine de la culture cellulaire : suivi de l'activite proliferative des cellules in vitro, maintien de l'etat differencie dans diverses conditions de culture, activite de detoxication.