Protéolyse calcium-dépendante et différenciation de la cellule musculaire : intervention des protéines kinases C et des phénomènes de phosphorylation

• Auteur / Autrice : Bernadette Aragon
• Direction : Patrick Cottin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences des aliments
• Date : Soutenance en 2000
• Etablissement(s) : Bordeaux 1

Résumé

Les travaux de recherche de cette thèse s'inscrivent dans la thématique générale de notre laboratoire concernant l'étude du système protéolytique neutre calcium-dépendant (calpaïnes), ses rôles biologiques et ses mécanismes de fonctionnement au cours de la différenciation musculaire. Les travaux réalisés précédemment dans notre laboratoire avaient permis de mettre en évidence un complexe natif µ-calpaïne/PKCα dans le muscle squelettique et de montrer, in vitro, une implication de la µ-calpaïne dans la régulation de la PKCα au sein de ce complexe, dans des conditions proches du milieu intracellulaire. Les objectifs de ce travail ont donc été de mieux comprendre l'implication des calpaïnes, notamment de la µ-calpaïne, dans la régulation de la PKCα in situ lors de la différenciation musculaire. Des cellules musculaires en cours de différenciation (cultures primaires de myoblastes de rat) ont servi de modèle d'étude. Ce modèle nous a permis de suivre l'expression des calpaïnes et de la PKCα au sein de la cellule musculaire et d'appréhender le rôle de ces enzymes dans les étapes clés de la différenciation (prolifération, fusion des myoblastes, mise en place des myofibrilles, contractions spontanées). Des approches expérimentales, permettant de moduler l'activité ou l'expression de la PKCα ou des calpaïnes (traitement aux esters de phorbol, utilisation d'inhibiteurs des calpaïnes, oligodéoxyribonucléotides antisens dirigés contre les sous-unités catalytiques de la µ-calpaïne et de la m-calpaïne) nous ont permis de mieux comprendre les interactions calpaïnes/PKCα, mais également de comprendre comment la µ-calpaïne et la PKCα pouvaient être impliquées dans la régulation de la protéine MARCKS (substrat cytosquelettique des PKC), lors de la myogenèse.