Role et caracterisation fine des lymphocytes t cytotoxiques (ctl) induits par un vaccin lipopeptidique dans le modele macaque rhesus / siv

• Auteur / Autrice : LORENZO MORTARA
• Direction : Jean-Gérard Guillet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Dans un premier temps nous avons voulu determiner le role in vivo des reponses t cd8+ cytotoxiques (ctl) dans le modele macaque rhesus/siv grace a un suivi longitudinal de 2 ans de 2 cohortes de 12 macaques, une infectee par le siv, l'autre vaccinee par un melange de lipopeptides comprenant 7 sequences issues des proteines nef et gag puis infectee par le siv. Nous avons pu montrer que la presence de reponses ctl etait inversement correlee a la viremie cellulaire, et que la reponse cytotoxique avait un role benefique sur l'evolution clinique des animaux puisqu'elle etait associee a une phase asymptomatique de plus longue duree. Ensuite, afin d'etudier le devenir des reponses ctl chez les macaques vaccines apres infection, nous avons immunise 4 autres macaques par les memes lipopeptides. Chez 2 macaques la reponse ctl induite etait dirigee contre un seul et meme epitope de la proteine nef et cette reponse monospecifique etait perdue au 5 e m e mois. L'analyse des sequences provirales de nef chez les 2 macaques a montre que il y avait eu la selection d'un variant viral minoritaire moins immunogene, puis l'apparition d'un mutant d'echappement. Un autre macaque ne presentait pas de ctl ni apres immunisation ni apres infection et a evolue rapidement vers un sida. Le quatrieme macaque qui possedait des ctl bispecifiques a montre lui aussi la selection de variants et l'apparition de mutants d'echappement mais avec un controle majeur de la charge virale et une periode asymptomatique plus longue. Afin d'obtenir des reponses ctl polyspecifiques nous avons ajoute un epitope cd4 a notre preparation vaccinale, pouvant induire une forte reponse t auxiliaire : le peptide 830-846 de l'anatoxine tetanique. Huit autres macaques ont ete immunises avec la tt puis avec les 8 lipopeptides dans une nouvelle formulation vaccinale de micelles mixtes. Nous avons mis en evidence une reponse ctl chez 7 macaques sur 8 et chez 2 d'entre eux ces reponses etaient polyspecifiques dirigees contre 4 a 6 peptides de nef et/ou de gag et etaient correlees avec la presence d'une reponse th cd4+ anti-peptide tt 830-846 de type th1 (secretion d'ifn-). Apres le test d'inoculation d'epreuve les macaques n'ont pas ete proteges contre l'infection, neanmoins, a partir du 3 e m e mois, le macaque ayant des ctl diriges contre 6 epitopes a une viremie cellulaire et plasmatique indetectables.