Etude de la resistance au stress acide de lactococcus lactis
Auteur / Autrice : | FABIEN RALLU |
Direction : | Alexandra Gruss |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales |
Date : | Soutenance en 1999 |
Etablissement(s) : | Paris 6 |
Résumé
Nous avons montre que l. Lactis, comme les autres bacteries neutrophiles, ne survit pas a une acidification brutale du milieu (passage de ph 7 a un ph inferieur ou egal a 4). Pour survivre en fin de fermentation a l'acidite qu'elle genere, cette bacterie induit une reponse adaptative au stress acide necessitant une synthese proteique de novo. Nous avons fait l'hypothese que des mutants affectes dans le controle de reponses aux stress pourraient etre constitutivement resistants a l'acidite. Trente mutants de transposition ont ete isoles grace a une combinaison de stress acide et thermique. Ces mutants, appeles arl (pour acid resistance locus), ont pu etre repartis en quatre classes phenotypiques selon leur comportement en conditions acides. Certains mutants sont egalement plus resistants que la souche sauvage a d'autres stress. Ces differents phenotypes suggerent que l. Lactis possede plusieurs mecanismes lui permettant de faire face a l'acidification de son environnement. Nous avons montre que les taux intracellulaires de phosphate et de guanosine phosphorylee (gmp, gdp, gtp, (p)ppgpp) interviennent dans l'expression de certaines de ces resistances aux stress. Nous avons poursuivi l'etude des mutants rela et arl5 afin de d'identifier les facteurs responsables de leur resistance multi-stress. Rela est responsable de la synthese du (p)ppgpp, l'effecteur de la reponse stringente ; arl5 code pour une proteine de fonction inconnue qui pourrait avoir un role de regulateur transcriptionnel. Nous avons montre que la resistance constitutive de ces mutants impliquait des genes de biosynthese de la paroi et de reparation de l'adn. Cependant, la resistance de rela et d'arl5 resulterait de mecanismes au moins en partie differents, puisque certaines mutations sensibilisent uniquement l'un des deux mutants.