Etudes de genes de la lignee mono-macrophagique regules au cours de l'inflammation

• Auteur / Autrice : JOCELYNE BIGIAOUI JUST
• Direction : Yvon Cayre
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

L'inflammation est un mecanisme de defense contre les infections virales et bacteriennes durant lequel de nombreux genes des cellules hematopoietiques sont regules. L'objectif general de cette these a ete d'analyser au cours de l'inflammation, la fonction de produits de deux genes regules durant la differenciation myeloide, la fructose 1,6-biphosphatase (fbpase) et la myelobastine ou proteinase 3 (mbn/pr3). Nous avons mis en evidence une consequence fonctionnelle a l'analogie structurale existant entre une cytokine pro-inflammatoire, l'interferon-gamma (ifn - ) et la p17 du virus de l'immunodeficience humaine. Nous avons observe : (1) une induction de l'expression du gene de la fbpase dans les monocytes circulants en presence de 25-hydroxyvitamine-d 3 et de l'ifn - ou de la p17, secondaire a l'induction de la 1-hydroxylase qui est un mediateur de la production autocrine de 1,25-dihydroxyvitamine-d 3 , ; (2) une augmentation de la production d'atp dans les monocytes traites par la p17, qui participerait au transport du complexe viral au noyau. Au cours des exacerbations infectieuses de la mucoviscidose, la mbn/pr3 participe a la reponse inflammatoire classiquement dependante du neutrophile et deletere pour le poumon. Nous avons montre (1) que les neutrophiles circulants contiennent 20 fois plus de mbn/pr3 que les monocytes ; (2) qu'il existe une induction du gene de la mbn/pr3 monocytaire (et non neutrophilique) au cours des exacerbations de la mucoviscidose. Ainsi, la mbn/pr3 monocytaire interviendrait precocement dans le processus inflammatoire de la maladie. Afin de rechercher une fonction a la mbn/pr3 au cours de l'infection bacterienne dans un modele de souris mbn/pr3 - / -, nous avons clone deux fragments en 5 et en 3 du gene de la mbn/pr3 de souris en criblant une banque d'adn genomique avec des sondes d'adnc de mbn/pr3 murin et d'oligonuceotides correspondant aux sequences exoniques. Nous avons amplifie les introns par pcr pour les sequencer afin de confirmer les jonctions exons-introns. Le gene de 7 kb de la mbn/pr3 murine est situe comme celui de la neutrophile elastase sur le chromosome 10. Il contient 5 exons et 4 introns codant pour une pre-proforme de la proteine. Nous avons realisee un vecteur de ciblage en prealable a la creation d'une souris mbn/pr3 - / -.