Thèse soutenue

Mecanismes de regulation de l'activite de malt, l'activateur transcriptionnel du regulon maltose chez escherichia coli

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Auteur / Autrice : VALERIE SCHREIBER
Direction : Evelyne Richet
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales
Date : Soutenance en 1999
Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

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Chez les enterobacteries, le regulon maltose regroupe un ensemble d'operons dont les genes codent les proteines du systeme de transport et du metabolisme des maltodextrines et, chez klebsiella oxytoca, les proteines impliquees dans la secretion de la pullulanase. L'expression de ces operons est controlee par un activateur transcriptionnel specifique du regulon maltose, la proteine malt et par un regulateur global, la proteine crp. L'activite de malt (102 kda) est regulee, au niveau de la proteine, positivement par l'atp et le maltotriose et negativement par 3 proteines, malk, maly et aes. Dans un premier temps, a l'aide d'approches biochimiques et biophysiques, nous avons caracterise la structure quaternaire de malt en solution en presence de differentes combinaisons d'effecteurs. Ainsi, nous avons montre qu'en absence d'effecteur malt est monomerique ; (ii) qu'en presence de ces effecteurs positifs, l'atp et le maltotriose, la proteine malt oligomerise en solution et (iii) que son oligomerisation est impliquee dans la fixation de malt sur les promoteurs maltose. Nous avons egalement debute une caracterisation structurale des complexes nucleoproteiques formes entre malt et les promoteurs maltose. La seconde thematique de ce memoire porte sur la repression exercee par la proteine maly sur malt. Bien que le role de maly soit connu depuis longtemps grace a des experiences genetiques, nous ignorions tout du mecanisme moleculaire a la base de cet effet represseur. Nous avons montre (i) qu'un tel mecanisme passe par des interactions directes proteine-proteine entre malt et maly et n'implique aucun autre facteur et (ii) que la fixation de maly sur malt entre en competition avec la fixation du maltotriose sur malt, regulant ainsi l'activite transcriptionnelle de cet activateur.