Caracterisation des toxines de bacillus thuringiensis serovar jegathesan, actif sur les larves de dipteres vecteurs de maladies tropicales

• Auteur / Autrice : MARIE-LAURE ROSSO
• Direction : Marguerite Lecadet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques fondamentales et appliquées. Sciences médicales
• Date : Soutenance en 1999
• Etablissement(s) : Paris 6

Résumé

La lutte biologique contre les moustiques, vecteurs de maladies tropicales est effectuee principalement a l'aide des bacteries bacillus thuringiensis israelensis (bti) et bacillus sphaericus (bsp). L'activite entomopathogene de ces bacteries est principalement liee a la production au cours de la sporulation d'inclusions cristallines. Dans le but de retarder l'eventuelle apparition d'insectes resistants, de nouvelles toxines ont ete recherchees. Les genes codant les proteines de 80 kda (cry11ba) et 65 kda (cry19aa), presentes dans les inclusions produites par b. Thuringiensis jegathesan (btjeg) au cours de la sporulation, ont ete clones et leurs produits analyses : cry11ba joue un role tres important dans la toxicite de btjeg pour les larves de moustiques alors que cry19aa semble avoir une participation plus faible. La toxicite de la proteine cry19aa est augmentee en presence d'un autre constituant du cristal de btjeg : le polypeptide orf2 de 66 kda, constituant non toxique seul. Les genes cry11ba et cry19aa sont exprimes pendant la phase de sporulation, respectivement sous l'action des facteurs sigma e et k. Le gene cry19aa est, de plus, regule par des facteurs specifiques de la phase de transitoire de croissance (facteur sigma h et/ou proteine spo0a). Le gene orf2 serait sous la dependance du promoteur du gene cry19aa dans une structure de type operon. Par ailleurs, des sequences d'insertion de type is240 ont ete mises en evidence au voisinage de ces genes. Ces elements sont tres largement distribues chez b. Thuringiensis et ont ete trouves dans toutes les souches actives sur les moustiques analysees. Afin d'ameliorer les potentialites insecticides de bsp, des genes codant differentes toxines (cry11aa de bti et/ou cry11ba de btjeg) actives sur les larves de moustiques ont ete introduits par recombinaison homologue dans le chromosome de bsp. Les souches recombinantes ainsi obtenues possedent un spectre d'action elargi par rapport a celui de la souche parentale et permettent de restaurer partiellement la sensibilite des populations de moustiques resistantes aux toxines de la souche parentale.